RNA病毒拯救的新颖方法

摘要：

本发明涉及产生命名为单链负义RNA病毒目（Mononegaviral）的无节段、负义、单链RNA病毒的改良方法，包括关于产生减毒和／或传染病毒的这些病毒，如麻疹病毒（MV）和呼吸道合胞病毒（RSV）的方法的实施例。用于产生单链负义病毒目的重组病毒的一种方法包含（a）在至少一个宿主细胞中，进行拯救组合物的转染，该组合物中包含在能充分允许载体共表达和产生重组病毒条件下的宿主细胞中；（i）一个含有分离的核酸分子的转录载体，该核酸分子中含有编码单链负义病毒目的无节段、负义单链RNA病毒基因组或反基因组的多核苷酸序列，和（ii）至少一个表达载体，该表达载体含有编码衣壳包装、转录和复制所必需的反式作用蛋白的一种以上的分离的核酸分子；（b）在能充分增加重组病毒挽救的条件下，加热转染的拯救组合物至有效热休克温度；和可任选的，（c）收集得到的重组病毒。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN99806717.2

申请日期：1999-06-03

公开/公告号：CN1303426

公开/公告日：2001-07-11

主分类号：C12N7/02

申请/专利权人:美国氰胺公司

发明/设计人:C·L·帕克斯;M·S·西迪;S·A·乌登;G·R·科瓦奇

主申请人地址:美国新泽西州

专利代理机构:上海专利商标事务所

代理人:徐迅

国别省市代码:美国;US

权利要求：

权利要求书1．一种产生重组单链负义病毒目病毒的方法，其特征在于，该方法包含：(a)在至少一个介质中的宿主细胞中，进行拯救组合物的转染，该组合物中包含在能充分允许载体共表达和产生重组病毒条件下的宿主细胞中；(ⅰ)一个含有分离的核酸分子的转录载体，该核酸分子中含有编码单链负义病毒目的无节段、负义单链RNA病毒基因组或反基因组的多核苷酸序列，和(ⅱ)至少一个表达载体，该表达载体含有编码衣壳包装、转录和复制所必需的反式作用蛋白的一种以上分离的核酸分子；(b)在能充分增加重组病毒挽救的条件下，加热转染的拯救组合物至有效热休克温度。