三股螺旋蛋白的稳定表达

摘要：

本发明涉及一种在酵母中生产羟化三股螺旋蛋白的方法，包括以下步骤：将编码P4Hα亚基的第一核苷酸序列、编码P4Hβ亚基的第二核苷酸序列以及一个或几个产物编码核苷酸序列导入一种合适的酵母宿主细胞，所述产物编码核苷酸序列编码一种或几种多肽或肽，这些多肽或肽在羟化以后生成所述羟化三股螺旋蛋白，所述第一、第二和产物编码核苷酸序列的每一个均可操作地与启动子序列连接；在适于表达所述第一、第二和产物编码核苷酸序列的条件下培养所述酵母宿主细胞，从而产生所述羟化三股螺旋蛋白；其中，该方法的特征在于导入所述第一、第二和产物编码核苷酸序列的步骤会导致所述第一、第二和产物编码核苷酸序列及其相应的可操作地连接的启动子序列被携带在一个或几个可复制的DNA分子上；该分子在所述培养步骤中由所述酵母宿主细胞稳定地保持并分离。还披露了用本发明方法生产的转化酵母宿主细胞和三股螺旋蛋白。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN97181012.5

申请日期：1997-10-29

公开/公告号：CN1242044

公开/公告日：2000-01-19

主分类号：C12N15/12

申请/专利权人:联邦科学及工业研究组织

发明/设计人:P·R·沃恩; M·加拉尼斯; J·A·M·拉姆肖; J·A·维尔克梅斯特

主申请人地址:澳大利亚澳大利亚首都直辖区

专利代理机构:中国专利代理(香港)有限公司

代理人:卢新华% 齐曾度

国别省市代码:澳大利亚;AU

权利要求：

1．一种在酵母中生产羟化三股螺旋蛋白的方法，该方法包括以下步骤：将编码 P4Hα亚基的第一核苷酸序列、编码 P4Hβ亚基的第二核苷酸序列以及一个或几个产物编码核苷酸序列导入一种合适的酵母宿主细胞，所述产物编码核苷酸序列编码一种或几种多肽或肽，这些多肽或肽在羟化以后生成所述羟化三股螺旋蛋白，所述第一、第二和产物编码核苷酸序列的每一个均可操作地与启动子序列连接；和在适于表达所述第一、第二和产物编码核苷酸序列的条件下培养所述酵母宿主细胞，从而产生所述羟化三股螺旋蛋白；其中，该方法的特征在于导入所述第一、第二和产物编码核苷酸序列的步骤会导致所述第一、第二和产物编码核苷酸序列及其相应的可操作地连接的启动子序列被携带在一个或几个可复制的DNA分子上，该分子在所述培养步骤中由所述酵母宿主细胞稳定地保持并分离。