一种新型的重组腺病毒伴随病毒的生产系统
一种新型的重组腺病毒伴随病毒生产系统，是由以质粒pＨＳＶ－ＡＡＶ产生的单纯疱疹病毒混合毒种（见中国专利申请号９６１２０５４９．０）和转化了带ＥＢ病毒复制子的重组ＡＡＶ载体转移质粒pＢＤＺ（＋）或pＢＤＺ（－）而获得的稳定传代细胞系所组成。当克隆了外源基因的pＢＤＺ（＋）或pＢＤＺ（－）转染Ｖero细胞，可建立稳定的传代细胞系。当上述单纯疱疹病毒混合病毒感染该细胞系时，由混合病毒提供重组ＡＡＶ包装的辅助功能和反式蛋白，pＢＤＺ（＋）或pＢＤＺ（－）载体上的ＡＡＶ－２ＩＴＲ提供包装重组ＡＡＶ的必需信号，从而能产生高滴度的重组ＡＡＶ病毒。
发明专利
CN97116981.0
1997-10-08
CN1213699
1999-04-14
C12N15/64
中国预防医学科学院病毒学研究院
舒跃龙; 颜子颖; 侯云德
100052北京市宣武区迎新街100号
北京;11
1,一种新型的重组腺病毒伴随病毒（AdenO，associated vinis，AAv ）的生产系统由以下部分组成：（1）、由pHSV，AAV（十／-）产生的11SU-1混合病毒，其中野生型的HSV-1病毒提供类似腺病毒功能的辅助病毒的作用，假型病毒中携带的十几个拷贝的AAv基因组序列可表达以提供重组AAV的复制蛋白和结蛋白的反式功能，以支持携带外源基因的重AAv载体包装成重组AAv病毒颗粒。（见中国专利申请号96 120549．O)（2）、可以用来产生稳定传代细胞的重组AAV转移质粒由以下DNA元件组成：（1）： EB病毒质粒型复制子oriP及其反式作用因子EBNA-1。（2）：真核细胞抗性选择标志（潮霉素日磷酸转移酶基因）。（3）：两侧AAv-2长145bp的反向末端重复（ITR）的由CMV早期启动子起动井带有接头的表达盒（4）∶大肠杆菌质粒骨架（大肠杆菌复制子和氨辛青霉素抗性β-内酞胺酶基因）