在人肝癌细胞特异表达的自主复制型载体及其用途

摘要：

一种在人肝癌细胞特异病毒的自主复制型载体及其用途，它是由肝癌细胞特异的启动子——甲胎蛋白基因的启动子、ＥＢ病毒质粒型复制子及其反式作用因子、真核细胞抗性选择标志、和带大肠杆菌复制子和氨苄青霉素抗性基因的大肠杆菌质粒骨架所组成。它可以非病毒感染的形式将外源基因导入细胞内自主复制和仅在产甲胎蛋白的肝癌细胞才发生特异表达，具有比直接使用重组病毒颗粒直接感染细胞更高的安全性，主要用于原发性肝癌的基因治疗，可选择性杀死肿瘤细胞而不影响正常细胞的功能。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN96101408.3

申请日期：1996-02-14

公开/公告号：CN1135531

公开/公告日：1996-11-13

主分类号：C12N15/86

申请/专利权人:中国预防医学科学院病毒学研究所

发明/设计人:颜子颖; 侯云德; 乔健; 李福胜

主申请人地址:100052北京市宣武区迎新街100号

专利代理机构:北京京强专利事务所

代理人:林强

国别省市代码:北京;11

权利要求：

一种在人肝癌细胞特异表达的自主复制型载体ｐＥＢＡＦ，其特征在于由下列ＤＮＡ元件组成：（１）、肝癌细胞表达特异启动子、增强子－－－－－－甲胎蛋白基因上游调控序列；（２）、甲胎蛋白启动子、增强子之后有多个单酶切位点ＢａｍＨＩ、ＳａｌＩ、ＰｖｕＩＩ供插入外源基因之用，多克隆位点后是源于ＳＶ４０病毒的２５３３－－－２７７０ｂｐ处的加多聚腺苷酸信号序列；（３）、人细胞自主复制子及其反式作用因子－－－－－－ＥＢ病毒质粒型复制所需序列元件ＯｒｉＰ、ＥＢＮＡ－Ｉ；（４）、真核胞抗性选择标志基因（潮霉素Ｂ磷酸转移酶基因）；（５）、大肠杆菌质粒骨架（包括大肠杆菌复制子和氨苄青霉素抗性β内酰氨酶基因）。