使用荧光染料检测双链核酸的同相方法和其中使用的药盒

摘要：

一种能定量检测扩增过的核酸的高灵敏度同相方法。用高亲合性荧光染料可在扩增期间或扩增后进行检测。所述染料选自非对称花青染料类，具有至少两个正电荷和在从约１×１０⁴到约５×１０⁵（摩尔浓度^－１），范围内的结合常数（Ｋｂ）。用于试验的试剂可以包含在为扩增例如经聚合酶链反应所设计的试剂盒中。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN95106515.7

申请日期：1995-04-29

公开/公告号：CN1114359

公开/公告日：1996-01-03

主分类号：C12Q1/68

申请/专利权人:临床诊断系统公司

发明/设计人:Ｊ·Ｗ·苏瑟兰; Ｄ·Ｒ·帕特森

主申请人地址:美国纽约

专利代理机构:中国专利代理(香港)有限公司

代理人:姜建成

国别省市代码:美国;US

权利要求：

一种检测双链靶核酸的同相方法，包括以下步骤：（Ａ）扩增双链靶核酸，（Ｂ）使所形成的扩增过的双链靶核酸与荧光染料接触，当所述染料结合到所述双链靶核酸上时，与其结合到所述双链靶核酸的单链上产生的信号或者染料在其自由状态下产生的信号相比较，能显示出可检测的信号，和（Ｃ）检测或测定所述可检测的信号，以测定所述双链靶核酸的存在或数量，其中，所述荧光染料是不对称花青染料，与双链核酸的结合常数（Ｋｂ）从约１×１０↑［４］至５×１０↑［５］（摩尔浓度↑［－１］），具有结构式Ⅰ所代表的结构：＊＊＊其中Ｘ是－Ｓ－、－Ｏ－、－Ｓｅ－、＝ＣＨ－或－ＮＲ↑［１］－Ｙ是－ＣＨ＝ＣＨ－，Ｒ是１至６个碳原子的烷基，Ｒ↑［１］是氢或１至６个碳原子的烷基，Ｒ↑［２］和Ｒ↑［６］分别是１至１０个碳原子的亚烷基，Ｒ↑［３］、Ｒ↑［４］和Ｒ↑［５］分别是１到６个碳原子的烷基，Ｚ↑［１］包括构成５或６员杂环必需的碳原子和杂原子，Ｚ↑［２］包括构成５或６员芳环必需的碳原子和杂原子，Ｑ是酸阴离子，ｎ是０、１或２，ｍ、ｐ和ｑ分别是０或１，条件是ｐ和ｑ不相同，ｒ是１或２，和ｔ是０、１或２，其中所述的检测或测定在所述扩增过的双链靶核酸不杂化成捕获探子的情况下进行。