一种制造重组人粒－巨噬细胞集落刺激因子的方法

摘要：

本发明涉及一种利用基因工程技术制造重组人粒－巨噬细胞集落刺激因子方法，其目的在于提高粒－巨噬细胞集落刺激因子的表达水平，便于纯化制备。利用ＰＣＲ技术改构其cDNA成熟肽编码区５'端，消除其强二级结构，将其插入高效表达载体，受热诱导后得到高效表达，分离包含体、溶解、复性、纯化后得到比活性＞１×１０⁷，纯度>９８％的重组人粒－巨噬细胞集落刺激因子纯品，可以满足临床应用要求。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN95101619.9

申请日期：1995-02-16

公开/公告号：CN1129255

公开/公告日：1996-08-21

主分类号：C12N15/27

申请/专利权人:中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所

发明/设计人:汲言山; 沈倍奋

主申请人地址:100850北京市海淀区太平路27号

国别省市代码:北京;11

权利要求：

一种利用基因工程技术制造重组人粒－巨噬细胞集落刺激因子的方法，其特征在于用ＰＣＲ方法对人粒－巨噬细胞集落刺激因子ｃＤＮＡ的改构，获得重组质粒以及对此工程菌进行表达，经离心、洗涤液洗涤、回收包含体、尿素溶解、稀释复性液中复性，经Ｑ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ和ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００层析柱纯化，分步收集可得重组人粒－巨噬细胞集落刺激因子纯品。