改进的测定核酸序列的方法
公开了一种改进的循环探针反应。
发明专利
CN94192876.4
1994-06-16
CN1129461
1996-08-21
C12Q1/68
ID生物学和医学公司
B·D·法达茨
加拿大不列颠哥伦比亚
中国国际贸易促进委员会专利商标事务所
杜京英
加拿大;CA
检测单链靶核酸的方法,包括:a.提供一种反应混合物,包括:靶核酸;互补的单链核酸探针,该探针相对于靶是摩尔数过量的并且具有[NA↓[1]-R-NA↓[2]]↓[n]的结构,其中NA↓[1]与NA↓[2]为DNA顺序,R为可被切割的核酸连接体,n为1~10之间的一个整数;以及RNaseH,RNaseH的化学势足以明显增加双链体形成的速率,该速率大于RNaseH缺乏时双链体的形成速率,并促使靶-探针双链体的形成;b.处理得自于步骤(a)的靶-探针双链体,以便在可被切割的核酸连接体中预先确定的序列上切割探针,从而形成至少一个包含探针寡核苷酸片段的完整的DNA,如此的探针片段不再具有或者经处理不再具有与靶核酸杂交的能力;c.重复步骤(a)与(b)的循环;并且d.检测如此形成的包含探针片段的完整的DNA,从而检测出单链靶核酸。