改良型人肿瘤坏死因子的基因及其生产工艺

摘要：

本发明属于基因工程生产多肽药物领域，用于治疗恶性肿瘤。本发明所述改良型ＴＮＦ为删除ＴＮＦ第三、四位的丝氨酸和第七、八位的苏氨酸、脯氨酸，将第五位的丝氨酸改为赖氨酸，由１５３个氨基酸组成的ＴＮＦ变体蛋白。改良后的ＴＮＦ基因在大肠杆菌中高效表达并分离纯化成单一组分纯品，比活为３—８×１０⁷u/mg，比天然ＴＮＦ比活高３—５倍，毒性也相应降低，基因表达水平比天然ＴＮＦ表达水平高一倍，由２４％增加至５０％左右，因此，分离纯化工艺简单，得率高，成本低，适宜大规模生产。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN94111496.1

申请日期：1994-11-09

公开/公告号：CN1123326

公开/公告日：1996-05-29

主分类号：C12N15/28

申请/专利权人:南京大学

发明/设计人:徐贤秀

主申请人地址:210008江苏省南京市汉口路22号

专利代理机构:南京大学专利事务所

代理人:胡锡瑜

国别省市代码:江苏;32

权利要求：

一种改良型人肿瘤坏死因子基因特征是：删除ＴＮＦ第三、四位的丝氨酸和第七、八位的苏氨酸、脯氨酸的密码子，将第五位的丝氨酸改为赖氨酸密码子，经基因表达产生由１５３个氨基酸组成的ＴＮＦ变体蛋白。