DNA扩增
本发明公开了一种在体内扩增亲本细胞基因组中DNA序列B的方法。
发明专利
CN94109005.1
1994-06-22
CN1114355
1996-01-03
C12N15/10
诺沃挪第克公司
S·T·约根森
丹麦巴格斯瓦尔德
中国国际贸易促进委员会专利商标事务所
黄革生
丹麦;DK
一种在体内扩增亲本细胞基因组中DNA序列B的方法,包括:a)将含有C-M-A-D结构的DNA构建体整合到所说细胞的基因组中,其中,A表示与侧接或交叠待扩增DNA序列B的基因组DNA片段同源的DNA序列,或者是与作为DNA序列B构成的所说序列B的末端之一的基因组DNA片段同源的DNA序列;C表示与侧接或交叠待扩增DNA序列B的基因组DNA片段同源的DNA序列,或者是与作为DNA序列B构成的所说序列B的末端之一的基因组DNA片段同源的DNA序列,与序列A相比,序列C定位于序列B的相对的末端;D表示与序列B相比定位于序列C远端的基因组DNA片段同源的DNA序列;M表示编码选择标志的DNA序列,b)选择其中有DNA序列M与序列A一起整合至DNA序列B的上游或下游的基因组中的细胞,该细胞含有任意方向的A-B-C-M-A-D结构,c)在增加对于由DNA序列M编码的选择标记的选择压力下增殖步骤b)中选择的细胞,得到与亲本细胞相比增加了DNA序列B和M的基因组整合拷贝数的细胞。