悬浮吸附增殖甲型肝炎病毒的方法

摘要：

本发明涉及一种悬浮吸附增殖甲型肝炎病毒的方法。将细胞基质用胰酶——ＥＤＴＡ消化分散后接种甲肝活疫苗毒种，经培养繁殖、氯仿抽提和各种生物学检测后分装成甲肝疫苗成品。本发明可在节省细胞生长时间的同时，缩短病毒增殖周期，提高病毒的产毒量，另外可简化工艺过程，节省原料，降低生产成本。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN94101257.3

申请日期：1994-01-27

公开/公告号：CN1101941

公开/公告日：1995-04-26

主分类号：C12N7/00

申请/专利权人:中国医学科院医学生物研究所

发明/设计人:曹逸云; 周德久; 董德祥; 胡云章; 阳选祥; 陈统球; 刘开明; 白惠珠; 张瑞菊; 杨净思

主申请人地址:650107云南省昆明市花红洞

专利代理机构:云南省专利事务所

代理人:徐玲菊% 王昆汉

国别省市代码:云南;53

权利要求：

一种采用悬浮吸附增殖甲型肝炎病毒的方法，以人胚肺二倍体细胞或适合于甲肝病毒增殖的其它细胞为基质接种甲型肝炎减毒活疫苗毒种，经培养繁殖、氯仿抽提，各种生物学检测获得甲肝减毒活疫苗，其特征在于采用下列工艺步骤接种甲型肝炎减毒活疫苗毒种：ａ、将基质细胞用胰酶－ＥＤＴＡ消化分散为单个细胞，加入Ｅａｇｌｅ及０．１５－０．３０％乳蛋白营养液制成浓缩细胞液，其浓度为每毫升溶液含１００－１５０万个细胞；ｂ、在上述细胞液中按０．０５－０．２ＭＯＩ接种甲型肝炎减毒活疫苗毒种，在４－３７℃温度下进行悬浮吸附３０－９０分钟；ｃ、将悬浮吸附的细胞、病毒混合液用Ｅａｇｌｅ及０．１５－０．３％乳蛋白营养液稀释扩量１０－１５倍，使每毫升生长液中含有细胞９－１３万个，并以此溶液量为基础加入５－１０％小牛血清培养繁殖。