一种新的(ZSP)大豆原生质体培养基

摘要：

一种新的（ＺＳＰ）大豆原生质体培养基属生物技术领域。能解决大豆原生质体培养成胚性愈伤组织的技术问题。该培养基的特征是以大豆根瘤产物的酰尿为主要氮源，调节培养基中ＮＨ_４⁺、ＮＯ_３^-比，ｐＨ和渗透压，明显提高细胞分裂频率，保持胚性，高频率形成胚性愈伤组织，这种愈伤组织在体细胞胚分化培养基上，能分化出体细胞胚并再生植株。$该培养基适于培养大豆等豆科植物未成熟子叶原生质体，通过胚性愈伤组织，经胚胎发生途径诱导植株再生。是大豆细胞工程和基因操作的重要基础技术。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN92110373.5

申请日期：1992-09-03

公开/公告号：CN1083525

公开/公告日：1994-03-09

主分类号：C12N5/04

申请/专利权人:东北农学院

发明/设计人:张贤泽

主申请人地址:150030黑龙江省哈尔滨市东北农学院科研处

国别省市代码:黑龙江;23

权利要求：

一种新的（ＺＳＰ）大豆原生质体培养基，其特征在于，该培养基根据大豆氮代谢特点，以大豆根瘤产物为主要氮源制成。大豆根瘤产物中的天冬酰胺、谷氨酰胺、尿囊素和尿囊酸等酰尿有机态氮化合物为培养基的主要氮源。１．培养基成分组成及其配方；（１）培养基成分组成（Ａ）成分含量（ｍｇ／ｌ）ＮＨ↓［４］ＮＯ↓［３］４０ＫＮＯ↓［３］９５０ＫＨ↓［２］ＰＯ↓［４］８５Ｈ↓［３］ＢＯ↓［３］６．２ＭｎＳＯ↓［４］·４Ｈ↓［２］Ｏ２２．３ＺｎＳＯ↓［４］·７Ｈ↓［２］Ｏ８．６Ｎａ↓［２］ＭｏＯ↓［４］·２Ｈ↓［２］Ｏ０．２５ＣｕＳＯ↓［４］·５Ｈ↓［２］Ｏ０．０２５ＣｏＣｌ↓［２］·６Ｈ↓［２］Ｏ０．０２５ＭｇＳＯ↓［４］·７Ｈ↓［２］Ｏ１８５ＣａＣｌ↓［２］·２Ｈ↓［２］Ｏ２２０ＫＩ０．８３烟酸０．５盐酸吡哆醇０．５盐酸硫铵素０．１甘氨酸２肌醇１００Ｎａ↓［２］－ＥＤＴＡ３７．３ＦｅＳＯ↓［４］·７Ｈ↓［２］Ｏ２７．８蔗糖１５，０００甘露醇８０，０００２，４－Ｄ０．１ＢＡ１ＰＨ５．８渗透压５６０～５８０ｍＯＳＭＯＬ／ｋｇ（Ｂ）成分含量（ｍｇ／ｌ）天冬酰胺６０谷氨酰胺６０尿囊素６０尿囊酸６０盐酸硫铵素０．６Ｃａｓａｍｉｎｏａｃｉｄ１２５（２）培养基配方：培养基成分中的Ａ部分调制后，以０、０１ＮＫＯＨ调ＰＨ为５、８，用甘露醇调整渗透压为５８０ｍＯＳＭＯＬ／ｋｇ，在０、１１ｍＰａ下灭菌１５分钟，冷却后在无菌条件下，滤过灭菌（０、４５μ）添加Ｂ部分，使培养基成分达到要求水平。