利用家蚕高效表达天花粉蛋白及其他有用蛋白的方法

摘要：

本发明通过基因工程技术，从家蚕核多角体病毒ＨＢ分离株中克隆了含多角体蛋白基因的片段，利用ＰＣＲ定点突变法，构建了新型高效家蚕核多角体病毒转移载体质粒。该质粒的５＇及３＇端同源序列区小于普通转移载体质粒，适合于基因工程的操作。多角体蛋白基因启动子的结构完整，有利于高效表达。３＇端引入了三套ＴＡＡ终止密码，可以有效地终止外源基因的翻译。中间的多聚克隆位点适合于外源基因的插入。天花粉蛋白基因被插入到该质粒，并由些构建了含天花粉蛋白基因的重组家蚕核型多角体病毒，并在家蚕活体内表达了该基因。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN91110465.8

申请日期：1991-11-12

公开/公告号：CN1062001

公开/公告日：1992-06-17

主分类号：C12N15/29

申请/专利权人:北京大学

发明/设计人:储瑞银; 陈章良; 鲍一明; 林玉莲

主申请人地址:100871北京市海淀区

专利代理机构:北京大学专利事务所

代理人:孙博宁

国别省市代码:北京;11

权利要求：

本发明属于基因工程领域，是一种以家蚕核型多角体病毒为载体，利用家蚕表达天花粉蛋白及其他有用蛋白质的方法。其特征在于利用构建的新型家蚕核型多角体病毒载体质粒，通过与野生型家蚕核多角体病毒在培养细胞中进行同源重组，获得重组病毒，在家蚕体内表达自然界难以大量获得的天花粉蛋白。本方法适合于利用同样方法表达其他外源基因。权利要求为：１、含有家蚕核型多角体病毒ＨＢ分离株多角体蛋白基因的ＥｃｏＲＩ１０．６ｋｂ片段及ＸｈｏＩ－ＢａｍＨＩ３．８ｋｂ片段，以及由ＸｈｏＩ－ＢａｍＨＩ片段引伸而来的一系列亚克隆片段。