一种胆红素氧化酶的制备方法

摘要：

一种胆红素氧化酶的制备方法，系属于微生物领域，其主要特征是它主要由如下工序组成：（１）筛选出一株高产露湿漆斑菌；（２）培养发酵；（３）离心或过滤除去菌体、收集上清液；（４）在７０—８０％饱和度的硫酸铵中沉淀、透析；（５）提纯，本发明在培养过程中加入了Ｚn、Ｃｕ等无机盐，制备的ＢＯＸ，不仅酶活性高，而且电泳纯度也很高，分子量约５０６１２、Ｋ_ｍ值２５μｍ、等电点为３．８，在３７３μｍ处有特异性吸收率。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN91106228.9

申请日期：1991-09-06

公开/公告号：CN1070225

公开/公告日：1993-03-24

主分类号：C12N9/02

申请/专利权人:中国科学院沈阳应用生态研究所

发明/设计人:苏风岩; 张素贤; 王显明; 刘学成; 邹铧; 王竹; 周谦; 宋凤茹; 苏跃新; 李维光; 孟冬娅;张惠文; 罗军; 董洪杰; 胡小芳

主申请人地址:110015辽宁省沈阳市文化路二段六号

专利代理机构:中国科学院沈阳专利事务所

代理人:闵宪智

国别省市代码:辽宁;21

权利要求：

一种胆红素氧化酶的制备方法，其特征在于它由如下工序组成：（1）从链霉菌、真菌、佛兰克氏菌中分离筛选出高产的胆红素氧化酶的露湿漆斑菌，（2）在500ml的摇瓶中发酵，培养基以20－60％的马铃薯，1－2％的葡萄糖或1－2％的蔗糖为辅助碳源，以1－2％蛋白陈和适量的玉米素为辅助氮源，以菸酸、泛酸为维生素，再加入适量的Mg、Zn、Co、Cu无机盐，PH：6．0-7．0、温度25-30.C，时间：旋转或往复摇床培养22-108小时。(3)离心或过滤除去菌体，收集上清液；（4）将上清液用硫酸铵中沉淀、透析，得到粗酶；（5）将粗酶脱色，用离子交换柱和分子筛柱提纯，得到精酶。