一种双水相系统提纯酶的方法

摘要：

本发明为一种用双水相系统提纯酶特别是荧光素酶的方法。用一种分子量或两种分子量混合的聚乙二醇和有机酸盐或无机酸盐组成的双水相系统，通过改变溶液的ｐＨ值和改变盐的种类和浓度的方法提高相分配系数，直接从细胞破碎物中在室温下提取纯度较高的医药用酶，试剂用酶等。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN89104519.8

申请日期：1989-07-01

公开/公告号：CN1048561

公开/公告日：1991-01-16

主分类号：C12N9/00

申请/专利权人:中国科学院微生物研究所

发明/设计人:孙万儒

主申请人地址:100080北京市海淀区中关村北一条13号

国别省市代码:北京;11

权利要求：

一种纯化酶，特别是荧光素酶的方法，该法包括用机械或化学的方法将发酵得到的细胞破碎，与水溶性聚合物聚乙二醇（ＰＥＧ）和盐溶液混合，低速离心进行相分离，除去细胞破碎物沉淀再加入ＰＥＧ和盐溶液，反复进行相反离４－６次，最后一次相分离用改变盐种类，盐浓度和ｐＨ值的方法使酶存在于下相水溶液中，经浓缩得到酶制剂，该方法的特征在于：ａ、用一种分子量或两种分子量混合的水溶性聚合物和有机酸盐或无机酸盐组成的双水相系统，　　ｂ、通过改变ｐＨ值提高相分配系数，　　ｃ、通过改变盐的种类和浓度提高相分配系数，　　ｄ、于室温下直接从细胞破碎物中提取酶。