BXIN_1931基因缺失的重组巴贝斯虫株、构建方法及应用
本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种BXIN_1931基因缺失的重组巴贝斯虫株、构建方法及应用。首先，本发明发现通过缺失羊巴贝斯虫新疆株转录因子BXIN_1931基因，能够抑制巴贝斯虫的生长，可作为靶点用于制备抑制巴贝斯虫感染的药物；其次，本发明以BXIN_1931基因为靶点，构建了羊巴贝斯虫BXIN_1931基因缺失虫株，所述虫株中运动相关基因的表达量显著下降，为巴贝斯虫模式虫株用于在虫体运动和运动相关基因功能研究中的应用，也可作为巴贝斯虫疫苗的候选虫株，为临床预防和治疗羊巴贝斯虫感染提供了新的靶点和治疗方案。
发明专利
CN202311637370.1
2023-12-01
CN117625822A
2024-03-01
C12Q1/6893(2018.01)
中国农业科学院兰州兽医研究所
王锦明;关贵全;杨吉飞;任巧云;殷宏;罗建勋
730046 甘肃省兰州市城关区徐家坪1号
北京力量专利代理事务所(特殊普通合伙)
毛婷
甘肃;62
1.BXIN_1931基因为靶点在筛选抑制巴贝斯虫感染药物中的应用，所述药物以BXIN_1931基因为靶点抑制BXIN_1931基因或受BXIN_1931基因调控的基因的表达。 2.通过在巴贝斯虫中缺失BXIN_1931基因制备巴贝斯虫减毒虫株的应用。 3.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述巴贝斯虫为羊巴贝斯虫。 4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述羊巴贝斯虫为羊巴贝斯虫新疆株；所述BXIN_1931基因的序列如SEQ ID NO.1所示。 5.BXIN_1931基因缺失的重组巴贝斯虫株，其特征在于，所述巴贝斯虫株为BXIN_1931基因缺失的巴贝斯虫。 6.如权利要求5所述的重组巴贝斯虫株，其特征在于，所述巴贝斯虫为羊巴贝斯虫。 7.如权利要求6所述的重组巴贝斯虫株，其特征在于，所述羊巴贝斯虫为羊巴贝斯虫新疆株；所述BXIN_1931基因的序列如SEQ ID NO.1所示。 8.如权利要求5-7任一所述的BXIN_1931基因缺失的重组巴贝斯虫株的构建方法，其特征在于，所述的方法是通过基因工程手段将原始巴贝斯虫中BXIN_1931基因缺失。 9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤： (1)利用聚合酶链式反应方法，以羊巴贝斯虫新疆株基因组为模版，扩增获得BXIN_1931基因的5'非翻译区和3'非翻译区、ef1α启动子、rap终止子，基因合成bsd基因和HA编码序列，并克隆至PbluescriptSK(+)质粒中，即为BXIN_1931基因敲除质粒； (2)将所述BXIN_1931基因敲除质粒电转染至体外培养的羊巴贝斯虫裂殖子中，经抗性筛选、克隆化、PCR和Western blot验证，获得BXIN_1931基因缺失虫株。 10.如权利要求5-7任一所述的BXIN_1931基因缺失的重组巴贝斯虫株在制备巴贝斯虫减毒活疫苗中的应用，或作为模式虫株在用于虫体运动和/或运动相关基因功能研究中的应用。