BBD29_12340基因启动子突变体及其在发酵生产L-谷氨酸中的应用
本发明公开了BBD29_12340基因启动子突变体及其在发酵生产L‑谷氨酸中的应用。本发明提供了一种提高细菌L‑氨基酸产量的方法，包括：将细菌基因组中的BBD29_12340基因的启动子(SEQ ID No.2)或BBD29_09880基因的启动子(SEQ ID No.6)替换为特定DNA分子(SEQ ID No.1)，实现细菌L‑氨基酸产量的提高。所述L‑氨基酸可为L‑谷氨酸。本发明对提高L‑谷氨酸产量具有重要意义。
发明专利
CN202311462183.4
2023-11-06
CN117535335A
2024-02-09
C12N15/77(2006.01)
宁夏伊品生物科技股份有限公司
苏厚波;魏爱英;孟刚;赵春光;李峰;王攀;马文有;张英
750100 宁夏回族自治区银川市永宁县杨和工业园
北京纪凯知识产权代理有限公司
张立娜
宁夏;64
1.一种提高细菌L-氨基酸产量的方法，包括如下步骤(A)或(B)： (A)将细菌基因组中的BBD29_12340基因的启动子替换为特定DNA分子，实现细菌所述L-氨基酸产量的提高； 所述BBD29_12340基因的启动子包含如下任一： (b1)核苷酸序列如SEQ ID No.2所示的DNA分子； (b2)来源于细菌且与(b1)具有95％以上同一性且具有启动子功能的DNA分子； (B)将细菌基因组中的BBD29_09880基因的启动子替换为特定DNA分子，实现细菌所述L-氨基酸产量的提高； 所述BBD29_09880基因的启动子包含如下任一： (c1)核苷酸序列如SEQ ID No.6所示的DNA分子； (c2)来源于细菌且与(c1)具有95％以上同一性且具有启动子功能的DNA分子； 所述特定DNA分子，为如下任一： (a1)核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的DNA分子； (a2)将SEQ ID No.1的第230位以外的若干个核苷酸进行保守替换后得到的具有启动子功能的DNA分子。 2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述细菌为谷氨酸棒杆菌。 3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述L-氨基酸为L-谷氨酸。 4.DNA分子，包含如下任一： (a1)核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的DNA分子； (a2)将SEQ ID No.1的第230位以外的若干个核苷酸进行保守替换后得到的具有启动子功能的DNA分子。 5.权利要求4所述的DNA分子在作为启动子中的应用。 6.含有权利要求4所述DNA分子的表达盒、重组载体或重组菌。 7.根据权利要求6所述的重组菌，其特征在于：所述重组菌为重组菌A或重组菌B； 所述重组菌A为将细菌基因组中的BBD29_12340基因的启动子替换为权利要求4所述的DNA分子后得到的重组菌； 所述BBD29_12340基因的启动子包含如下任一： (b1)核苷酸序列如SEQ ID No.2所示的DNA分子； (b2)来源于细菌且与(b1)具有95％以上同一性且具有启动子功能的DNA分子； 所述重组菌B为将细菌基因组中的BBD29_09880基因的启动子替换为权利要求4所述的DNA分子后得到的重组菌； 所述BBD29_09880基因的启动子包含如下任一： (c1)核苷酸序列如SEQ ID No.6所示的DNA分子； (c2)来源于细菌且与(c1)具有95％以上同一性且具有启动子功能的DNA分子。 8.根据权利要求7所述重组菌，其特征在于：所述细菌为谷氨酸棒杆菌。 9.如下任一应用： P1、权利要求4所述的DNA分子或权利要求6-8中任一所述的表达盒或重组载体或重组菌在生产L-氨基酸中的应用； P2、权利要求4所述的DNA分子或权利要求6-8中任一所述的表达盒或重组载体在构建产L-氨基酸工程菌株中的应用； P3、权利要求4所述的DNA分子或权利要求6-8中任一所述的表达盒或重组载体在制备含有L-氨基酸的食品、药品、饲料或化妆品中的应用。 10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：所述L-氨基酸为L-谷氨酸。