BBD29_03870基因启动子突变体及其应用
本发明公开了BBD29_03870基因启动子突变体及其应用。本发明提供了DNA分子在作为启动子中的应用；所述DNA分子包含核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的DNA分子，或者和将SEQ ID No.1的第290位以外的若干个核苷酸进行保守替换后得到的具有启动子功能的DNA分子。在谷氨酸棒杆菌中将BBD29_03870基因/BBD29_09880基因启动子替换为SEQ ID No.1所示的突变型启动子，均可以显著提高L‑谷氨酸产量。本发明对于提高棒状杆菌型细菌发酵生产L‑谷氨酸产量具有重要意义。
发明专利
CN202311462181.5
2023-11-06
CN117535293A
2024-02-09
C12N15/113(2010.01)
宁夏伊品生物科技股份有限公司
孟刚;魏爱英;李峰;赵春光;苏厚波;马文有;王攀;张坤;王吉玮
750100 宁夏回族自治区银川市永宁县杨和工业园
北京纪凯知识产权代理有限公司
张立娜
宁夏;64
1.DNA分子在作为启动子中的应用； 所述DNA分子包含如下任一： (a1)核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的DNA分子； (a2)将SEQ ID No.1的第290位以外的若干个核苷酸进行保守替换后得到的具有启动子功能的DNA分子。 2.DNA分子，包含如下任一： (a1)核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的DNA分子； (a2)将SEQ ID No.1的第290位以外的若干个核苷酸进行保守替换后得到的具有启动子功能的DNA分子。 3.含有权利要求2所述DNA分子的表达盒、重组载体或重组菌。 4.根据权利要求3所述的重组菌，其特征在于：所述重组菌为重组菌A或重组菌B； 所述重组菌A为将细菌基因组中的BBD29_03870基因的启动子替换为权利要求2所述的DNA分子后得到的重组菌； 所述BBD29_03870基因的启动子包含如下任一： (b1)核苷酸序列如SEQ ID No.2所示的DNA分子； (b2)来源于细菌且与(b1)具有95％以上同一性且具有启动子功能的DNA分子； 所述重组菌B为将细菌基因组中的BBD29_09880基因的启动子替换为权利要求2所述的DNA分子后得到的重组菌； 所述BBD29_09880基因的启动子包含如下任一： (c1)核苷酸序列如SEQ ID No.6所示的DNA分子； (c2)来源于细菌且与(c1)具有95％以上同一性且具有启动子功能的DNA分子。 5.一种提高细菌L-氨基酸产量的方法，包括如下步骤(A)或步骤(B)： (A)将细菌基因组中的BBD29_03870基因的启动子替换为权利要求2所述的DNA分子，实现细菌所述L-氨基酸产量的提高； 所述BBD29_03870基因的启动子包含如下任一： (b1)核苷酸序列如SEQ ID No.2所示的DNA分子； (b2)来源于细菌且与(b1)具有95％以上同一性且具有启动子功能的DNA分子； (B)将细菌基因组中的BBD29_09880基因的启动子替换为权利要求2所述的DNA分子，实现细菌所述L-氨基酸产量的提高； 所述BBD29_09880基因的启动子包含如下任一： (c1)核苷酸序列如SEQ ID No.6所示的DNA分子； (c2)来源于细菌且与(c1)具有95％以上同一性且具有启动子功能的DNA分子。 6.一种生产L-氨基酸的方法，包括如下步骤：将权利要求2所述的DNA分子导入能够合成所述L-氨基酸的生物细胞中，使权利要求1所述的DNA分子驱动所述生物细胞中所述L-氨基酸合成途径中基因的表达，得到重组生物细胞；培养所述重组生物细胞，得到所述L-氨基酸。 7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：所述生物细胞为能够合成所述L-氨基酸的细菌、酵母、藻、真菌、植物细胞或动物细胞。 8.如下任一应用： P1、权利要求2所述的DNA分子或权利要求3或4所述的表达盒或重组载体或重组菌在生产L-氨基酸中的应用； P2、权利要求2所述的DNA分子或权利要求3或4所述的表达盒或重组载体在构建产L-氨基酸工程菌株中的应用； P3、权利要求2所述的DNA分子或权利要求3或4所述的表达盒或重组载体在制备含有L-氨基酸的食品、药品、饲料或化妆品中的应用。 9.根据权利要求4所述的重组菌或权利要求5或7所述的方法，其特征在于：所述细菌为棒状杆菌型细菌； 进一步地，所述细菌为谷氨酸棒杆菌。 10.根据权利要求5-9中任一所述的方法或应用，其特征在于：所述L-氨基酸为L-谷氨酸。