84K杨PagAPA1基因在树木次生木质部发育中的调控作用

摘要：

84K杨PagAPA1基因在树木次生木质部发育中的调控作用，属于基因工程技术领域。本发明为了解决木材数量及品质的需要日渐增大，84K杨PagAPA1生物功能未知的问题，通过农杆菌介导的84K杨遗传转化系统获得了PagAPA1过量表达84K杨转基因植株，再利用一系列技术手段分析发现，PagAPA1的过量表达影响了植株的生长发育及木材的形成，主要体现在该基因影响树木次生细胞壁的木质素的沉积，进而改变木质部细胞的形态结构及分布，以上结果说明PagAPA1对树木次生木质部的发育具有一定调控作用。本发明研究内容对培育优质木材林木新品种具有重要的理论指导意义。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN202311457210.9

申请日期：2023-11-03

公开/公告号：CN117305356A

公开/公告日：2023-12-29

主分类号：C12N15/84(2006.01)

申请/专利权人:北京林业大学

发明/设计人:谢剑波;史玲玲

主申请人地址:100083 北京市海淀区清华东路35号

专利代理机构:北京市诚辉律师事务所

代理人:金银实%岳东升

国别省市代码:北京;11

权利要求：

1.84K杨PagAPA1基因在调控树木次生木质部发育中的应用，其特征在于，所述84K杨PagAPA1基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。 2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述84K杨PagAPA1基因编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。 3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用是通过PagAPA1基因的过量表达使84K杨生长迟缓，茎干木质部宽度增加，茎干木质部面积占茎面积的比率增加，木质素合成增加。 4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述应用是利用PagAPA1基因构建植物表达载体，然后将含有PagAPA1基因的植物表达载体转入84K杨中，获得转基因植株，具体包括如下步骤： (1)克隆84K杨PagAPA1基因，所述PagAPA1基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示； (2)将PagAPA1基因构建到植物表达载体中，获得重组载体； (3)将步骤(2)获得的重组载体转化到84K杨中，获得转基因植株，并通过抗性筛选、鉴定，获得转基因阳性植株。 5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，步骤(1)所述84K杨为84K杨(Populus alba×Populus glandulosa)野生型植株。 6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述步骤(1)中用于克隆84K杨PagAPA1基因的上游引物和下游引物核苷酸序列分别如SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示。 7.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述步骤(2)中植物表达载体为pBI121。 8.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述步骤(3)中对获得的转基因阳性植株进行实时荧光定量PCR检测，上游引物和下游引物核苷酸序列分别如SEQ ID No.5和SEQ IDNo.6所示。 9.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，步骤(3)所述转化方法为农杆菌转化法。 10.权利要求9所述含有84K杨PagAPA1基因的植物表达载体在影响树木次生木质部发育中的应用。