Asb15b基因和Asb14a基因的应用及减少鱼类肌间骨的方法

摘要：

本发明属于基因工程技术领域，利用CRISPR/Cas9技术分别敲除了Asb15b、Asb14a基因，结果显示Asb15b基因或Asb14a基因敲除的斑马鱼较野生WT斑马鱼肌间骨减少约40％和约35％，证明Asb15b基因或Asb14a基因可调控鱼类肌间骨发育和调控骨骼发育相关基因。通过敲除上述基因还可以减少鱼类肌间骨。本发明的基因编辑鱼可用于鱼类肌间骨发育模型或骨骼相关疾病模型研究等多个方向。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN202311342767.8

申请日期：2023-10-17

公开/公告号：CN117384911A

公开/公告日：2024-01-12

主分类号：C12N15/12(2006.01)

申请/专利权人:上海海洋大学

发明/设计人:陈良标;王化敏;牛明慧;胡瑞芹;胡鹏;吴智超

主申请人地址:201306 上海市浦东新区临港新城沪城环路999号

专利代理机构:上海唯智赢专利代理事务所(普通合伙)

代理人:吴瑾瑜

国别省市代码:上海;31

权利要求：

1.Asb15b基因或Asb14a基因在调控鱼类肌间骨发育方面的应用。 2.Asb15b基因或Asb14a基因在调控骨骼发育相关基因方面的应用。 3.根据权利要求2所述的应用，所述的骨骼发育相关基因为bmp6、sp7、sox6、aplp、collala、runx2b和smadl基因。 4.一种用于敲除Asb14a基因的gRNA，其特征在于，以Asb14a上如SEQ ID No.1的序列为靶点，SEQ ID No.1：5’GGCTGCCCGACTGGGTCTGA3’。 5.一种用于敲除Asb15b基因的gRNA，其特征在于，以Asb15b上如SEQ ID No.2的序列为靶点，SEQ ID No.2：5’GGCGGCTAAAGTGGGCTGTG 3’。 6.一种减少鱼类肌间骨的方法，其特征在于，包括以下步骤：敲除鱼类Asb15b基因和Asb14a基因中的至少一种。 7.根据权利要求6所述减少鱼类肌间骨的方法，其特征在于，以Asb14a上如SEQ IDNo.1的序列为靶点，SEQ ID No.1：5’GGCTGCCCGACTGGGTCTGA3’；以Asb15b上如SEQ ID No.2的序列为靶点，SEQ ID No.2：5’GGCGGCTAAAGTGGGCTGTG 3’。 8.敲除了Asb15b基因和/或Asb14a基因的斑马鱼在制备鱼类肌间骨发育模型方面的应用。 9.敲除了Asb15b基因和/或Asb14a基因的斑马鱼在在制备骨骼相关疾病模型方面的应用。