BglD2突变体、BglD2突变酶及其制备方法和应用

摘要：

本发明提供了一种BglD2突变体、核酸分子、重组质粒、宿主细胞、BglD2突变酶及其制备方法和应用，其中，BglD2突变体为单一位点的点突变，突变点为D156、D411中的任意一个。本发明解决了BglD2热稳定性差的技术问题，实现了提高BglD2热稳定性的技术效果。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN202311164774.3

申请日期：2023-09-11

公开/公告号：CN117143849A

公开/公告日：2023-12-01

主分类号：C12N9/42(2006.01)

申请/专利权人:浙大宁波理工学院

发明/设计人:齐莉莉;王进波;曹飞强

主申请人地址:315000 浙江省宁波市高教园区钱湖南路1号

专利代理机构:浙江中桓凯通专利代理有限公司

代理人:刘潇

国别省市代码:浙江;33

权利要求：

1.一种BglD2突变体，其特征在于，所述BglD2突变体为单一位点的点突变，突变点为D156、D411中的任意一个。 2.根据权利要求1所述的BglD2突变体，其特征在于，所述BglD2突变体的突变点为D156，BglD2突变体D156E的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。 3.根据权利要求1所述的BglD2突变体，其特征在于，所述BglD2突变体的突变点为D411，BglD2突变体D411E的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。 4.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求1-3中任一项所述的BglD2突变体。 5.一种重组质粒，其特征在于，所述重组质粒包含权利要求4所述的核酸分子。 6.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞包含权利要求5所述的重组质粒。 7.一种BglD2突变酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： 根据BglD2基因序列，设计权利要求1所述的BglD2突变体的突变引物，采用同源重组的方法，以含有BglD2野生型序列的pET-22b(+)质粒为模板，在BglD2引入目的位点进行定点突变，获得重组产物； 将所述重组产物转化至感受态细胞，构建表达菌株； 诱导表达所述表达菌株，并进行纯化，得到所述BglD2突变酶。 8.一种BglD2突变酶，其特征在于，采用权利要求7所述的制备方法制备得到。 9.一种权利要求8所述的BglD2突变酶的应用，其特征在于，应用于制备白藜芦醇。