(R)-β-红没药烯合酶CcTPS2和其编码基因及其应用
本发明公开了一种用于合成(R)‑β‑红没药烯的萜类合酶CcTPS的编码基因及其产物(R)‑β‑红没药烯作为抗菌和降脂药物的应用，属于合成生物学和天然药物化学技术领域。本发明从唇形科植物火把花出发，克隆并功能鉴定了一个合成(R)‑β‑红没药烯的萜类合酶CcTPS2编码基因，其核苷酸序列如Seq ID No.2所示，与表达载体pCold‑TF连接，构建成为能够在大肠杆菌中表达的重组质粒，再将重组质粒转化至大肠杆菌中构建成为工程细胞，实现了大肠杆菌异源合成化合物(R)‑β‑红没药烯，本发明构建的该基因工程细胞安全稳定，生产周期短，显示出其在应用开发中的重大价值。本发明提供的产物具有抗菌和脂肪抑制活性，能够在制备抗菌药物和减脂药物中应用。
发明专利
CN202310174179.1
2023-02-28
CN116376884A
2023-07-04
C12N9/88(2006.01)
中国科学院昆明植物研究所
黎胜红;刘燕;李德森;石琳琳;刘艳春
650201 云南省昆明市盘龙区蓝黑路132号
昆明祥和知识产权代理有限公司
马晓青
云南;53
1.(R)-β-红没药烯合酶CcTPS2，其特征在于：其为： (1)Seq ID No.1所示氨基酸序列构成的蛋白； (2)Seq ID No.1所示的氨基酸序列经取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸残基且功能相同的衍生蛋白。 2.权利要求1所述(R)-β-红没药烯合酶CcTPS2的编码基因，其特征在于：所述的编码基因为： (a)Seq ID No.2所示的核苷酸序列； (b)Seq ID No.2所示的核苷酸序列经取代和/或缺失和/或添加一个或几个核苷酸且表达相同功能蛋白的核苷酸序列。 3.含有权利要求2所述的CcTPS2编码基因的重组载体。 4.含有权利要求2所述的(R)-β-红没药烯合酶CcTPS2编码基因的表达盒。 5.含有权利要求2所述的(R)-β-红没药烯合酶CcTPS2编码基因的转基因细胞系。 6.含有权利要求2所述的(R)-β-红没药烯合酶CcTPS2编码基因的重组菌。 7.权利要求1或2所述的(R)-β-红没药烯合酶CcTPS2或其编码基因在制备含有(R)-β-红没药烯合酶CcTPS2编码基因的重组载体、表达盒、转基因细胞系、重组菌中的应用。 8.权利要求1或2所述的(R)-β-红没药烯合酶CcTPS2或其编码基因在制备含有化合物(R)-β-红没药烯的发酵液中的应用，其特征在于所述的应用是采用：构建含有(R)-β-红没药烯合酶CcTPS2的编码基因的表达载体，将所述重组载体转化至大肠杆菌中，将获得的基因工程细菌进行发酵培养，得到含有(R)-β-红没药烯的发酵液。 9.化合物(R)-β-红没药烯的制备方法，其特征在于该方法包括下述步骤： 构建含有(R)-β-红没药烯合酶CcTPS2的编码基因的表达载体，将所述重组载体转化至大肠杆菌中，将获得的基因工程细菌进行发酵培养，得到含有(R)-β-红没药烯的发酵液，通过石油醚或乙酸乙酯萃取后获得含有(R)-β-红没药烯的浸膏，经硅胶柱层析方法分离纯化，最终得到如下结构式所示的化合物(R)-β-红没药烯， 10.权利要求1或2所述的(R)-β-红没药烯合酶CcTPS2或其编码基因在制备化合物(R)-β-红没药烯中的应用。 11.权利要求1或2所述的(R)-β-红没药烯合酶CcTPS2或其编码基因在制备香精香油、日用化妆品、抗菌药物、脂肪抑制物、降脂药物中的应用。 12.权利要求9所述的倍半萜类化合物(R)-β-红没药烯或权利要求3～8任意一项所述制备方法得到的倍半萜类化合物(R)-β-红没药烯在制备香精香油、日用化妆品、抗菌药物、脂肪抑制物、降脂药物中的应用。 13.根据权利要求11或12所述的应用，其特征在于，所述抗菌或降脂药物为所述所用病原菌、病原菌抑制剂、脂肪染色剂。 14.一种药物组合物，包括药剂学上可接受的药物辅料和化合物(R)-β-红没药烯。