ARMS引物、应用、毛母细胞瘤的PCR检测试剂、方法、试剂盒

摘要：

本发明公开了一种ARMS引物、应用、毛母细胞瘤的PCR检测试剂、方法、试剂盒，涉及生物检测技术领域，毛母细胞瘤的PCR检测试剂包括：用于扩增第一目标基因的ARMS引物，以及荧光探针；ARMS引物包括第一序列段和第二序列段；第一序列段的核苷酸序列如下：SEQ ID NO.1：5’‑AGGGCTGGTTAATAGTGAGTGCT‑3’；第二序列段的核苷酸序列如下：SEQ ID NO.2：5’‑CCACCAAGGGAAGCAAATCACAGA‑3’；荧光探针的核苷酸序列如下：SEQ ID No.3：5’‑CCAGGCCATGTCCATAAAGC‑3’。本申请利用荧光技术对毛母细胞瘤的基因突变位点进行检测，仅需数小时即可完成检测，相比于传统的病理诊断，能够准确鉴别毛母细胞瘤和基底细胞癌。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN202211323687.3

申请日期：2022-10-27

公开/公告号：CN116103396A

公开/公告日：2023-05-12

主分类号：C12Q1/6886(2018.01)

申请/专利权人:北京大学第三医院(北京大学第三临床医学院)

发明/设计人:张纯;柳剑英;吴德福;董栩然;黄琛

主申请人地址:100083 北京市海淀区花园北路49号

专利代理机构:北京名华博信知识产权代理有限公司

代理人:鲁盛楠

国别省市代码:北京;11

权利要求：

1.一种ARMS引物，其特征在于，用于扩增第一目标基因，所述ARMS引物包括第一序列段和第二序列段； 所述第一序列段的核苷酸序列如下：SEQ ID NO.1：5’-AGGGCTGGTTAATAGTGAGTGCT-3’； 所述第二序列段的核苷酸序列如下：SEQ ID NO.2：5’-CCACCAAGGGAAGCAAATCACAGA-3’。 2.根据权利要求1所述的ARMS引物，其特征在于，所述第一目标基因包括OR9G1基因。 3.根据权利要求1所述的ARMS引物作为毛母细胞瘤检测引物的应用，其特征在于，所述检测为荧光PCR检测。 4.一种毛母细胞瘤的PCR检测试剂，其特征在于，所述检测试剂包括权利要求1所述的ARMS引物，以及荧光探针； 所述荧光探针的核苷酸序列如下：SEQ ID No.3：5’-CCAGGCCATGTCCATAAAGC-3’； 所述荧光探针的5’端标记有荧光基团，所述荧光探针的3’端标记有淬灭基团。 5.根据权利要求4所述的毛母细胞瘤的PCR检测试剂，其特征在于，所述ARMS引物的浓度为80μM-150μM；所述荧光探针的浓度为80μM-150μM。 6.一种毛母细胞瘤的荧光PCR检测方法，其特征在于，所述方法包含使用权利要求4或5所述的毛母细胞瘤的PCR检测试剂的步骤。 7.根据权利要求6所述的毛母细胞瘤的荧光PCR检测方法，其特征在于，所述毛母细胞瘤的荧光PCR检测方法，包括： 采用所述毛母细胞瘤的PCR检测试剂，在PCR扩增条件下扩增第一目标基因； 获取关于所述荧光探针的荧光信号的强度值，根据所述荧光信号的强度达到目标强度值时，所述第一目标基因的扩增循环次数获得检测结果。 8.根据权利要求7所述的毛母细胞瘤的荧光PCR检测方法，其特征在于，所述PCR扩增条件是：93℃-95℃变性；60℃-64℃退火；72℃延伸，扩增循环次数大于30次。 9.一种荧光PCR试剂盒，其特征在于，所述荧光PCR试剂盒包括权利要求4或5所述的毛母细胞瘤的PCR检测试剂。