AtLecRK-VI.1基因及其编码蛋白在调控植物根长中的应用

摘要：

本申请公开一种AtLecRK‑VI.1基因及其编码蛋白在调控植物根长中的应用，涉及生物技术和育种技术领域；本申请通过基因敲除实验验证了AtLecRK‑VI.1基因的在调控上植物根长上的功能；通过构建CRISPR/Cas9基因敲除载体转化拟南芥，获得突变体植株，突变体植株根长与野生型植株相比显著性降低，表明AtLecRK‑VI.1基因具有调控植物根长的功能，本申请首次揭示了AtLecRK‑VI.1基因于调控植物根长上的生物学功能，为阐明根长这一农艺性状相关的分子机制提供了新的思路，为进一研究植物根系性状改良奠定理论基础，同时也为根系性状改良提供了潜在的新基因资源。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN202211267908.X

申请日期：2022-10-17

公开/公告号：CN116042646A

公开/公告日：2023-05-02

主分类号：C12N15/29(2006.01)

申请/专利权人:惠州学院

发明/设计人:彭小群;郭湘怡;许景美;谭红柳;胡均钧;彭丹宜;范梦丽;王梦龙

主申请人地址:516000 广东省惠州市惠城区河南岸街道演达大道46号

专利代理机构:广东华专知识产权代理事务所(普通合伙)

代理人:曾华杨

国别省市代码:广东;44

权利要求：

1.AtLecRK-VI.1基因在调控植物根长上的应用，其特征在于：所述AtLecRK-VI.1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。 2.AtLecRK-VI.1蛋白在调控植物根长上的应用，其特征在于：所述AtLecRK-VI.1蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。 3.根据权利要求1-2任一项所述的应用，其特征在于：所述调控植物的根长为植物的主根长。 4.一种调控拟南芥根长的方法，其特征在于：突变拟南芥中AtLecRK-VI.1基因，进而获得突变体植株。 5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：构建AtLecRK-VI.1基因的CRISPR/Cas9敲除载体并转化拟南芥植株。 6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述CRISPR/Cas9敲除载体为pHEE401E-AtLecRK-VI.1。 7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：所述pHEE401E-AtLecRK-VI.1敲除载体的构建包括以下步骤： S1.针对核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示的AtLecRK-VI.1基因选择靶位点并设计PCR引物，采用三引物法进行PCR扩增，获得含所述靶位点序列的线性DNA片段； S2.将上述线性DNA片段连入pHEE401E载体，构建得到pHEE401E-AtLecRK-VI.1敲除载体。 8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：步骤S1中所述靶位点的序列为：5'-GTCGAGTGCTCACTATGTAA-3'。 9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于：步骤S1中采用的三引物分别为：AtLecRK-VI.1-BsF：5'-ATATATGGTCTCGATTGTCGAGTGCTCACTATGTAAGTT-3'；AtLecRK-VI.1-F0：5'-TGTCGAGTGCTCACTATGTAAGTTTTAGAGCTAGAAATAGC-3'；BsR：5'-ATTATTGGTCTCGAAACAATCTCTTAGTCGACTCTACCAAT-3'。 10.AtLecRK-VI.1基因的CRISPR/Cas9敲除载体或质粒在调控植物根长中的应用。