ADGRA2突变基因及其作为肺癌骨转移标志物的应用

摘要：

本发明首次提供了一种特定的人ADGRA2突变基因，该突变基因是由于野生型ADGRA2基因发生g.18084_18086insGCT突变而形成的，突变所在基因片段的具体序列如SEQ ID NO：2所示。ADGRA2基因发生g.18084_18086insGCT突变的肺癌患者其骨转移风险高，其可以做为肺癌骨转移的有效可靠分子标志物；本发明还提供了基于数字PCR的ADGRA2突变基因的检测试剂盒和检测方法，这些可以简便有效应用到肺癌患者骨转移的解析中，有助于肺癌患者骨转移的早发现和早干预，也可以为肺癌骨转移的机理解析提供线索。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN202210959866.X

申请日期：2022-08-11

公开/公告号：CN116064791A

公开/公告日：2023-05-05

主分类号：C12Q1/6886(2018.01)

申请/专利权人:河南省肿瘤医院

发明/设计人:高方方;吴慧娟;鲁俊锋

主申请人地址:450008 河南省郑州市东明路127号

专利代理机构:广州京诺知识产权代理有限公司

代理人:轩青涛

国别省市代码:河南;41

权利要求：

1.一种ADGRA2突变基因，其特征在于：NCBI登录号为NC_000008.11的DNA片段中的第37796883-37844896区域序列为野生型ADGRA2基因参考序列，参照NCBI登录号为NC_000008.11中的野生型ADGRA2基因序列，所述ADGRA2突变基因是由野生型ADGRA2基因发生g.18084_18086insGCT突变而形成的，突变所在基因片段的具体序列如SEQ ID NO：2所示，其余基因序列参照野生型ADGRA2基因序列；ADGRA2基因发生g.18084_18086insGCT的肺癌患者骨转移风险高。 2.如权利要求1所述的发生g.18084_18086insGCT突变的ADGRA2突变基因在构建肺癌患者骨转移分析的检测试剂盒和检测方法中的应用。 3.一种基于数字PCR的ADGRA2基因的g.18084_18086insGCT突变片段的检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒含有能够扩增ADGRA2基因的g.18084_18086insGCT突变片段的引物和探针，具体是如SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6序列所示的数字PCR扩增引物以及如SEQ IDNO：8序列所示的靶向g.18084_18086insGCT突变的检测探针。 4.一种基于数字PCR的ADGRA2基因的g.18084_18086insGCT突变片段的检测方法，其特征在于：所述ADGRA2基因突变的检测方法的主要步骤为：获取肺癌患者的癌灶组织或血液样本，以提取的样本DNA为模板，对于ADGRA2基因的g.18084_18086insGCT突变片段，采用如SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6序列所示的数字PCR引物进行扩增，采用如SEQ ID NO：8序列所示的靶向g.18084_18086insGCT突变基因的探针进行扩增和检测，扩增条件为：96℃预变性8min；95℃变性15s，59℃退火延伸30s，循环40次；98℃终反应10min；若肺癌患者样本中检出含有ADGRA2基因的g.18084_18086insGCT突变，则表示其为骨转移或骨转移高风险。