ACVR2B在调控猪产肉性能中的应用及改良猪产肉性能的方法

摘要：

本发明提供了ACVR2B在调控猪产肉性能中的应用及改良猪产肉性能的方法，属于基因干扰和基因敲除技术领域。本发明首次提出ACVR2B具有调控猪骨骼肌卫星细胞增殖分化的作用，采用本发明提供的siRNA干扰骨骼肌卫星细胞24h，ACVR2B的mRNA丰度显著下降，肌细胞增殖发育相关基因MyoD和MyoG的mRNA丰度显著上升；干扰48h后，ACVR2B的蛋白表达水平显著下降，MyoD和MyoG的蛋白表达水平显著上调。采用本发明构建的CRISPR/Cas9系统能够成功靶向敲除猪ACVR2B基因，在转录水平上，敲除后的单克隆细胞相较于对照组ACVR2B的mRNA丰度显著下降。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN202210874272.9

申请日期：2022-07-22

公开/公告号：CN116083481A

公开/公告日：2023-05-09

主分类号：C12N15/85(2006.01)

申请/专利权人:湖北省农业科学院畜牧兽医研究所

发明/设计人:毕延震;陈矾;顾浩;任红艳

主申请人地址:430070 湖北省武汉市洪山区南湖瑶苑4号

专利代理机构:北京高沃律师事务所

代理人:黄明光

国别省市代码:湖北;42

权利要求：

1.ACVR2B在调控猪产肉性能中的应用。 2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述ACVR2B通过调控猪骨骼肌卫星细胞增殖分化发挥调控猪产肉性能的作用。 3.一种改良猪产肉性能的方法，其特征在于，所述方法包括干扰ACVR2B基因的表达或靶向敲除猪ACVR2B基因。 4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，干扰ACVR2B基因表达的siRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示。 5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述靶向敲除猪ACVR2B基因的方法为采用CRISPR/Cas9系统进行基因敲除，所述CRISPR/Cas9系统包括sgRNA-1和sgRNA-2，所述sgRNA-1和sgRNA-2的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5所示。 6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述靶向敲除猪ACVR2B基因的片段如SEQID NO.6所示。 7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述CRISPR/Cas9系统的构建方法包括如下步骤：使用BbsI酶切CRISPR/Cas9载体pX459，得到线性化表达载体；将所述sgRNA-1和sgRNA-2分别与线性化表达载体连接，得到靶向敲除猪ACVR2B基因的pX459-puro-sgRNA-1和pX459-puro-sgRNA-2，构建得到靶向敲除猪ACVR2B基因的CRISPR/Cas9系统。 8.一种靶向敲除猪ACVR2B基因的试剂盒，其特征在于，包括权利要求5所述的CRISPR/Cas9系统。 9.权利要求8所述试剂盒在提高猪肉产量中的应用。 10.权利要求8所述试剂盒在提高猪肉品质中的应用。