专利专题

aroG醛缩酶变体及利用其生产支链氨基酸的方法

引用
本申请涉及aroG醛缩酶(磷酸‑2‑脱氢‑3‑脱氧庚酸醛缩酶)变体、包含该变体的微生物,以及使用该微生物生产氨基酸的方法。

发明专利

CN202180089416.3

2021-11-18

CN116867895A

2023-10-10

C12N9/10(2006.01)

CJ第一制糖株式会社

李河胤;金朱恩;李智惠;李羲奭;金径林

韩国首尔

中国贸促会专利商标事务所有限公司

郑天松

韩国;KR

1.aroG醛缩酶(磷酸-2-脱氢-3-脱氧庚酸醛缩酶)变体,其中对应于SEQ ID NO:1的氨基酸序列中自N末端起第217、310、403和462位的任一个或多个氨基酸被另一种氨基酸取代。 2.根据权利要求1所述的变体,其中所述变体包含选自对应于SEQ ID NO:1的氨基酸序列中自N末端起下列位的氨基酸的一个或多个取代: 第217位的氨基酸被精氨酸之外的氨基酸取代; 第310位的氨基酸被赖氨酸之外的氨基酸取代; 第403位的氨基酸被精氨酸之外的氨基酸取代;以及 第462位的氨基酸被谷氨酸之外的氨基酸取代。 3.根据权利要求1所述的变体,其中被另一种氨基酸取代是被非极性氨基酸或小尺寸氨基酸取代。 4.根据权利要求1所述的变体,其中另一种氨基酸是丙氨酸(Ala)。 5.根据权利要求1所述的变体,其中所述aroG醛缩酶变体与SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:23或SEQ ID NO:25具有99%以上的同源性或同一性。 6.根据权利要求1所述的变体,其中,与SEQ ID NO:1的aroG醛缩酶相比,所述aroG醛缩酶变体具有减弱的活性。 7.多核苷酸,其编码权利要求1~6之任一项所述的aroG醛缩酶变体。 8.载体,其含有权利要求7所述的多核苷酸。 9.棒杆菌属(Corynebacterium)微生物,其包含下列中的一种以上: 权利要求1~6之任一项所述的aroG醛缩酶变体, 编码所述aroG醛缩酶变体的多核苷酸;和 含有所述多核苷酸的载体。 10.根据权利要求9所述的微生物,其中所述棒杆菌属(Corynebacterium)微生物是谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)。 11.生产支链氨基酸的方法,其包括在培养基中培养根据权利要求9所述的微生物。 12.根据权利要求11所述的方法,其中所述方法还包括从微生物或培养基中回收支链氨基酸。 13.根据权利要求12所述的方法,其中所述支链氨基酸是选自下列的一种以上:L-亮氨酸、L-异亮氨酸和L-缬氨酸。
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