ANGPTL3的碱基编辑和使用其治疗疾病的方法

摘要：

本文提供了用于基因修饰或编辑的组合物及其治疗或预防某些病症的使用方法。公开了能够安全且有效地编辑肝脏中表达的基因靶标以持久地降低LDL‑C、从而治疗心血管疾病的主要病因的特定组合物和方法。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN202180041917.4

申请日期：2021-04-09

公开/公告号：CN116096883A

公开/公告日：2023-05-09

主分类号：C12N15/11(2006.01)

申请/专利权人:维乎医疗有限公司

发明/设计人:亚历山德拉·查德威克;卡兰特赫塔西尔·G·拉杰夫;埃伦·罗德;克里斯多佛·程;卡罗琳·瑞斯

主申请人地址:美国马萨诸塞州

专利代理机构:北京安信方达知识产权代理有限公司

代理人:贺淑东%武晶晶

国别省市代码:美国;US

权利要求：

1.一种用于编辑基因靶标的组合物，包含： (i)碱基编辑器融合蛋白，所述碱基编辑器融合蛋白包含可编程DNA结合结构域和脱氨酶，或编码其的mRNA， (ii)指导RNA，所述指导RNA包含tracr序列和间隔子序列，所述tracr序列用作所述碱基编辑器融合蛋白的结合支架，所述间隔子序列对应于ANGPTL3基因上的原间隔子， 其中所述指导RNA引导所述碱基编辑器融合蛋白在施用给哺乳动物对象时在体内实现所述ANGPTL3基因中的核碱基改变， 其中当所述指导RNA和所述mRNA以至少0.5mg/kg的总量施用时，所述碱基改变发生在所述哺乳动物对象的全部肝细胞的至少35％中，如通过下一代测序或桑格测序所测量。 2.如权利要求1所述的组合物，其中所述哺乳动物对象是食蟹猴， 其中当所述指导RNA和所述mRNA以约1mg/kg的总量施用时，所述碱基改变发生在所述食蟹猴的全部肝细胞的至少35％中，如通过下一代测序或桑格测序所测量。 3.如权利要求1所述的组合物，其中所述哺乳动物对象是食蟹猴， 其中当所述指导RNA和所述mRNA以约3mg/kg的总量施用时，所述碱基改变发生在所述食蟹猴的全部肝细胞的至少50％中，如通过下一代测序或桑格测序所测量。 4.如权利要求2所述的组合物，其中与所述施用前相比，所述核碱基改变导致所述食蟹猴中血液甘油三酯水平降低至少20％。 5.如权利要求3所述的组合物，其中与所述施用前相比，所述核碱基改变导致所述食蟹猴中血液甘油三酯水平降低至少50％。 6.如权利要求1-5中任一项所述的组合物，其中所述原间隔子位于剪接位点中。 7.如权利要求1-5中任一项所述的组合物，其中所述原间隔子互补序列位于所述ANGPTL3基因的反义链中。 8.如权利要求1-5中任一项所述的组合物，其中所述原间隔子互补序列位于所述ANGPTL3基因的有义链中。 9.如权利要求1-8中任一项所述的组合物，其中所述碱基改变发生在所述ANGPTL3基因上的所述原间隔子之外(脱靶位点)， 其中表14中列出的脱靶位点的编辑百分比分别低于或等于表14中列出的编辑百分比。 10.如权利要求1-9中任一项所述的组合物，其中所述脱氨酶是腺嘌呤脱氨酶并且其中所述核碱基改变是A·T到G·C的改变。 11.如权利要求1-10中任一项所述的组合物，其中所述可编程DNA结合结构域包含核酸酶活性丧失的Cas9或Cas9切口酶。 12.如权利要求1-11中任一项所述的组合物，其中所述核碱基改变位于所述ANGPTL3基因的剪接位点处。 13.如权利要求12所述的组合物，其中所述核碱基改变位于所述ANGPTL3基因的剪接供体位点处。 14.如权利要求13所述的组合物，其中所述剪接供体位点位于如SEQ ID NO:7中所引用的ANGPTL3内含子6的5’末端。 15.如权利要求12所述的组合物，其中所述核碱基改变位于所述ANGPTL3基因的剪接受体位点处。 16.如权利要求1-15中任一项所述的组合物，其中所述核碱基改变导致由所述ANGPTL3基因编码的转录物中的移码、提前终止密码子、插入或缺失。 17.如权利要求1-16中任一项所述的组合物，其中所述核碱基改变导致由所述ANGPTL3基因编码的异常转录物。 18.如权利要求1-17中任一项所述的组合物，其中所述指导RNA经化学修饰。 19.如权利要求16所述的组合物，其中所述指导RNA的所述tracr序列按照图7中描绘的方案进行化学修饰。 20.如权利要求1-19中任一项所述的组合物，其中所述间隔子序列包含表1中列出的ANGPTL3 ABE指导RNA间隔子序列。 21.如权利要求20所述的组合物，其中所述指导RNA包含如表1中所列出的GA067、GA091、GA098、GA099、GA100、GA101、GA102、GA103、GA347、GA441、GA442、GA472、GA473、GA474、GA475、GA476、GA517或GA547的ANGPTL3 ABE指导RNA序列。 22.如权利要求1-19中任一项所述的组合物，其中所述原间隔子序列包含表1中列出的ANGPTL3 ABE原间隔子序列。 23.如权利要求22所述的组合物，其中所述原间隔子包含序列5’-AAGATACCTGAATAACTCTC-3’(SEQ ID No:14)、5’-AAGATACCTGAATAACCCTC-3’(SEQ ID No:15)、5’-GATACCTGAATAACTCTC-3’(SEQ ID No:1606)、5’-AGATACCTGAATAACCCTC-3’(SEQ IDNo:248)或5’-GATACCTGAATAACCCTC-3’(SEQ ID No:249)。 24.如权利要求1-23中任一项所述的组合物，其中所述碱基编辑器融合蛋白包含SEQID No:2137的氨基酸序列。 25.如权利要求1-24中任一项所述的组合物，其中所述mRNA序列的GC％含量大于50％。 26.如权利要求25所述的组合物，其中所述mRNA序列的GC％含量大于56％。 27.如权利要求26所述的组合物，其中所述mRNA序列的GC％含量大于或等于63％。 28.如权利要求25所述的组合物，其中所述mRNA包含腺嘌呤tTNA脱氨酶(TadA)区域、Cas9区域和核定位序列(NLS)区域。 29.如权利要求28所述的组合物，其中所述mRNA进一步包含将所述TadA区域和所述Cas9区域连接的第一接头区域，以及将所述Cas9区域和所述NLS区域连接的第二接头区域。 30.如权利要求28或29所述的组合物，其中所述TadA区域的GC％含量大于60％。 31.如权利要求28或29所述的组合物，其中所述TadA区域的GC％含量大于或等于70％。 32.如权利要求28或29所述的组合物，其中所述Cas9区域的GC％含量大于56％。 33.如权利要求28或29所述的组合物，其中所述Cas9区域的GC％含量大于或等于62％。 34.如权利要求28或29所述的组合物，其中所述NLS区域的GC％含量大于54％。 35.如权利要求28或29所述的组合物，其中所述NLS区域的GC％含量大于或等于63％。 36.如权利要求29所述的组合物，其中所述第一接头区域的GC％含量大于65％。 37.如权利要求29所述的组合物，其中所述第一接头区域的GC％含量大于或等于79％。 38.如权利要求29所述的组合物，其中所述第二接头区域的GC％含量大于67％。 39.如权利要求29所述的组合物，其中所述第二接头区域的GC％含量大于或等于83％。 40.如权利要求29所述的组合物，其中所述TadA区域的GC％含量大于60％，所述Cas9区域的GC％含量大于56％，所述NLS区域的GC％含量大于54％，所述第一接头区域的GC％含量大于65％，并且所述第二接头区域的GC％含量大于67％。 41.如权利要求25所述的组合物，其中所述mRNA包含选自表23的mRNA序列。 42.如权利要求41所述的组合物，其中所述mRNA包含SEQ IDNo:2136的mRNA序列。 43.如权利要求25-42中任一项所述的组合物，其中所述mRNA包含多聚A尾。 44.如权利要求1-43中任一项所述的组合物，进一步包含包封(i)的脂质纳米颗粒(LNP)。 45.如权利要求44所述的组合物，其中所述LNP进一步包封(ii)。 46.如权利要求44所述的组合物，进一步包含包封(ii)的第二LNP。 47.如权利要求1-44中任一项所述的组合物，其中所述指导RNA和编码所述碱基编辑器融合蛋白的所述mRNA的重量比率为约1:10至约10:1。 48.如权利要求47所述的组合物，其中所述指导RNA与编码所述碱基编辑器融合蛋白的所述mRNA的重量比率为约1:1、1.5:1、2:1、3:1、4:1、1:1.5、1:2、1:3或1:4。 49.如权利要求48所述的组合物，其中所述指导RNA和编码所述碱基编辑器融合蛋白的所述mRNA的重量比率为约1:1。 50.一种药物组合物，包含如前述权利要求中任一项所述的组合物和药学上可接受的载体或赋形剂。 51.一种用于治疗或预防有需要的对象的病症的方法，所述方法包括向所述对象施用治疗有效量的如权利要求1所述的组合物。 52.如权利要求51所述的方法，其中所述施用是通过静脉内输注。 53.如权利要求51或52所述的方法，包括顺序施用包封(i)的LNP和包封(ii)的LNP。 54.如权利要求51或52所述的方法，包括并行施用所述包封(i)的LNP和所述包封(ii)的LNP。 55.如权利要求53所述的方法，包括施用单剂量的所述包封(ii)的LNP，然后在1天的间隔中施用交错剂量的所述包封(i)的LNP。 56.如权利要求53所述的方法，包括施用单剂量的所述包封(ii)的LNP，然后在2天的间隔中施用交错剂量的所述包封(i)的LNP。 57.如权利要求53所述的方法，包括施用单剂量的所述包封(ii)的LNP，然后在3天的间隔中施用交错剂量的所述包封(i)的LNP。 58.如权利要求53所述的方法，包括施用单剂量的所述包封(ii)的LNP，然后在4天的间隔中施用交错剂量的所述包封(i)的LNP。 59.如权利要求53所述的方法，包括施用单剂量的所述包封(ii)的LNP，然后在5天的间隔中施用交错剂量的所述包封(i)的LNP。 60.如权利要求53所述的方法，包括施用单剂量的所述包封(ii)的LNP，然后在6天的间隔中施用交错剂量的所述包封(i)的LNP。 61.如权利要求53所述的方法，包括施用单剂量的所述包封(ii)的LNP，然后在7天的间隔中施用交错剂量的所述包封(i)的LNP。 62.如权利要求51或52所述的方法，包括施用单剂量的所述包封(i)和(ii)的LNP。 63.如权利要求62所述的方法，其中所述LNP的所述单剂量为约0.3至约3mg/kg。 64.如权利要求62或63所述的方法，包括向所述对象施用一个或多个治疗的疗程，其中所述一个或多个治疗中的每一个包括一个或多个所述单剂量的所述LNP。 65.如权利要求64所述的方法，包括施用两个至十个治疗的疗程。 66.如权利要求64所述的方法，包括施用两个至五个治疗的疗程。 67.如权利要求64所述的方法，包括施用两个治疗的疗程。 68.如权利要求64所述的方法，包括施用三个治疗的疗程。 69.如权利要求64所述的方法，包括施用四个治疗的疗程。 70.如权利要求62所述的方法，包括施用五个治疗的疗程。 71.如权利要求51-70中任一项所述的方法，其中所述病症是动脉粥样硬化性心血管疾病。 72.如权利要求51-70中任一项所述的方法，其中所述病症是动脉粥样硬化性血管疾病。 73.如权利要求51-72中任一项所述的方法，其中所述对象是人。 74.一种用于编辑基因靶标的组合物，包含： (i)碱基编辑器融合蛋白，所述碱基编辑器融合蛋白包含可编程DNA结合结构域和脱氨酶，或编码其的mRNA， (ii)指导RNA，所述指导RNA包含tracr序列和间隔子序列，所述tracr序列用作所述碱基编辑器融合蛋白的结合支架，所述间隔子序列对应于ANGPTL3基因上的原间隔子， 其中所述指导RNA引导所述碱基编辑器融合蛋白在施用给哺乳动物对象时在体内实现所述ANGPTL3基因中的核碱基改变，并且 其中所述指导RNA包含如表1中所列出的ANGPTL3 ABE指导RNA序列。 75.一种用于编辑基因靶标的组合物，包含： (i)碱基编辑器融合蛋白，所述碱基编辑器融合蛋白包含可编程DNA结合结构域和脱氨酶，或编码其的mRNA， (ii)指导RNA，所述指导RNA包含tracr序列和间隔子序列，所述tracr序列用作所述碱基编辑器融合蛋白的结合支架，所述间隔子序列对应于ANGPTL3基因上的原间隔子， 其中所述指导RNA引导所述碱基编辑器融合蛋白在施用给哺乳动物对象时在体内实现所述ANGPTL3基因中的核碱基改变，并且 其中所述mRNA包含选自表23的序列。 76.一种在有需要的对象中治疗或预防动脉粥样硬化性心血管疾病的方法，所述方法包括向所述对象施用治疗有效量的第一组合物和第二组合物，所述第一组合物包含 (i)碱基编辑器融合蛋白，所述碱基编辑器融合蛋白包含可编程DNA结合结构域和脱氨酶，或编码其的mRNA， (ii)指导RNA，所述指导RNA包含tracr序列和间隔子序列，所述tracr序列用作所述碱基编辑器融合蛋白的结合支架，所述间隔子序列对应于PCSK9基因上的原间隔子， 其中所述指导RNA引导所述碱基编辑器融合蛋白在施用给哺乳动物对象时在体内实现所述PCSK9基因中的核碱基改变， 其中当所述指导RNA和所述mRNA以至少0.5mg/kg的总量施用时，所述碱基改变发生在所述哺乳动物对象的全部肝细胞的至少35％中，如通过下一代测序或桑格测序所测量； 所述第二组合物包含 (i)碱基编辑器融合蛋白，所述碱基编辑器融合蛋白包含可编程DNA结合结构域和脱氨酶，或编码其的mRNA， (ii)指导RNA，所述指导RNA包含tracr序列和间隔子序列，所述tracr序列用作所述碱基编辑器融合蛋白的结合支架，所述间隔子序列对应于ANGPTL3基因上的原间隔子， 其中所述指导RNA引导所述碱基编辑器融合蛋白在施用给哺乳动物对象时在体内实现所述ANGPTL3基因中的核碱基改变， 其中当所述指导RNA和所述mRNA以至少1mg/kg的总量施用时，所述碱基改变发生在所述哺乳动物对象的全部肝细胞的至少35％中，如通过下一代测序或桑格测序所测量。 77.如权利要求76所述的方法，包括顺序施用所述第一组合物和所述第二组合物。 78.如权利要求77所述的方法，包括施用一个或多个剂量的所述第一组合物，随后施用一个或多个剂量的所述第二组合物。 79.如权利要求78所述的方法，包括施用一个或多个剂量的所述第二组合物，随后施用一个或多个剂量的所述第一组合物。 80.如权利要求76所述的方法，包括并行施用所述第一组合物和所述第二组合物。 81.如权利要求80所述的方法，包括一个或多个剂量的所述第一组合物和所述第二组合物。 82.一种用于编辑基因靶标的组合物，包含： (i)碱基编辑器融合蛋白，所述碱基编辑器融合蛋白包含可编程DNA结合结构域和脱氨酶，或编码其的mRNA， (ii)指导RNA，所述指导RNA包含tracr序列和间隔子序列，所述tracr序列用作所述碱基编辑器融合蛋白的结合支架，所述间隔子序列对应于ANGPTL3基因上的原间隔子， 其中所述指导RNA引导所述碱基编辑器融合蛋白在体外实现所述ANGPTL3基因中的核碱基改变， 其中当所述指导RNA和所述mRNA以至少0.5mg/kg的总量施用时，所述碱基改变发生在所述哺乳动物对象的全部肝细胞的至少35％中，如通过下一代测序或桑格测序所测量。 83.如权利要求82所述的组合物，其中当所述指导RNA和所述mRNA以至少1mg/kg的总量施用时，所述碱基改变发生在所述哺乳动物对象的全部肝细胞的至少40％中，如通过下一代测序或桑格测序所测量。 84.如权利要求82所述的组合物，其中当所述指导RNA和所述mRNA以至少1.5mg/kg的总量施用时，所述碱基改变发生在所述哺乳动物对象的全部肝细胞的至少45％中，如通过下一代测序或桑格测序所测量。 85.如权利要求82所述的组合物，其中当所述指导RNA和所述mRNA以至少2mg/kg的总量施用时，所述碱基改变发生在所述哺乳动物对象的全部肝细胞的至少50％中，如通过下一代测序或桑格测序所测量。 86.如权利要求82所述的组合物，其中当所述指导RNA和所述mRNA以至少2.5mg/kg的总量施用时，所述碱基改变发生在所述哺乳动物对象的全部肝细胞的至少55％中，如通过下一代测序或桑格测序所测量。 87.如权利要求82所述的组合物，其中当所述指导RNA和所述mRNA以至少3mg/kg的总量施用时，所述碱基改变发生在所述哺乳动物对象的全部肝细胞的至少60％中，如通过下一代测序或桑格测序所测量。 88.一种用于编辑ANGPTL3基因的组合物，包含： (a)mRNA，所述mRNA编码具有编辑窗口的腺嘌呤碱基编辑器蛋白，和 (b)指导RNA，所述指导RNA包含tracr序列和间隔子序列，所述tracr序列用作所述碱基编辑器蛋白的结合支架，所述间隔子序列用于将所述碱基编辑器蛋白指引至所述ANGPTL3基因上的原间隔子序列， 其中所述间隔子序列至少部分地与所述ANGPTL3基因的剪接位点或外显子区域互补。 89.如权利要求83所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中当所述碱基编辑器蛋白与所述指导RNA可操作地结合并且所述指导RNA与所述ANGPTL3基因上的所述原间隔子序列的互补链杂交时，所述编辑窗口涵盖所述ANGPTL3基因的所述剪接位点。 90.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中当所述碱基编辑器蛋白与所述指导RNA可操作地结合并且所述指导RNA与所述ANGPTL3基因上的所述原间隔子序列的互补链杂交时，所述编辑窗口涵盖所述ANGPTL3基因的内含子的区域。 91.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中当所述碱基编辑器蛋白与所述指导RNA可操作地结合并且所述指导RNA与所述ANGPTL3基因上的所述原间隔子序列的互补链杂交时，所述编辑窗口涵盖所述ANGPTL3基因的内含子1、内含子3或内含子4的区域。 92.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中当所述碱基编辑器蛋白与所述指导RNA可操作地结合并且所述指导RNA与所述ANGPTL3基因上的所述原间隔子序列的互补链杂交时，所述编辑窗口涵盖所述ANGPTL3基因的内含子1的区域。 93.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述间隔子序列与选自经鉴定为GA067、GA100和GA574的指导RNA序列的间隔子序列具有80％-100％核苷酸序列同一性。 94.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述tracr序列与选自经鉴定为GA067、GA091、GA098、GA099、GA100、GA101、GA102、GA103、GA347、GA441、GA442、GA472、GA473、GA474、GA475、GA476、GA517和GA547的指导RNA序列的tracr序列具有80％-100％核苷酸序列同一性。 95.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述mRNA与经鉴定为MA002、MA004、MA040、MA0041或MA045的mRNA序列具有80％-100％序列同一性。 96.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述mRNA具有下表中列出的GC核苷酸区域百分比中的一个或多个： 核苷酸区域 平均GC核苷酸含量 27-213 67-73％ 389-661 67-71％ 735-829 63-74％ 4207-4286 67-70％ 4537-4569 65-73％ 4683-4741 62-67％ 97.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述mRNA具有下表中列出的GC核苷酸区域百分比中的一个或多个： 核苷酸区域 平均GC核苷酸含量 27-213 至少73％ 389-661 至少71％ 735-829 至少74％ 4207-4286 至少70％ 4537-4569 至少73％ 4683-4741 至少67％ 98.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述mRNA和gRNA被封装在脂质纳米颗粒中。 99.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述mRNA和gRNA被封装在脂质纳米颗粒中，所述脂质纳米颗粒具有以下项： LNP组合物(mol％)： 40-65％iLipid 2-20％DSPC 1-5％PEG 剩余的mol％余量是胆固醇； LNP粒径：55-120nm Z平均流体动力学直径；和 通过动态光散射确定的多分散性指数<0.2。 100.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述mRNA和gRNA被封装在LNP粒径为50-70nm Z平均流体动力学直径的脂质纳米颗粒内。 101.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约0.5mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够在所述食蟹猴的肝脏中在所述ANGPTL3靶剪接位点处诱导腺嘌呤碱基编辑，平均编辑百分比大于40％。 102.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约0.5mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够在所述食蟹猴的肝脏中在所述ANGPTL3靶剪接位点处诱导腺嘌呤碱基编辑，平均编辑百分比大于50％。 103.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约0.5mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够在所述食蟹猴的肝脏中在所述ANGPTL3靶剪接位点处诱导腺嘌呤碱基编辑，平均编辑百分比大于30％。 104.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够在所述食蟹猴的肝脏中在所述ANGPTL3靶剪接位点处诱导腺嘌呤碱基编辑，平均编辑百分比大于40％。 105.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够在所述食蟹猴的肝脏中在所述ANGPTL3靶剪接位点处诱导腺嘌呤碱基编辑，平均编辑百分比大于50％。 106.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够在所述食蟹猴的肝脏中在所述ANGPTL3靶剪接位点处诱导腺嘌呤碱基编辑，平均编辑百分比大于60％。 107.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够在所述食蟹猴的肝脏中在所述ANGPTL3靶剪接位点处诱导腺嘌呤碱基编辑，平均编辑百分比大于70％。 108.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1.5mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够在所述食蟹猴的肝脏中在所述ANGPTL3靶剪接位点处诱导腺嘌呤碱基编辑，平均编辑百分比大于40％。 109.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1.5mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够在所述食蟹猴的肝脏中在所述ANGPTL3靶剪接位点处诱导腺嘌呤碱基编辑，平均编辑百分比大于50％。 110.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1.5mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够在所述食蟹猴的肝脏中在所述ANGPTL3靶剪接位点处诱导腺嘌呤碱基编辑，平均编辑百分比大于60％。 111.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1.5mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够在所述食蟹猴的肝脏中在所述ANGPTL3靶剪接位点处诱导腺嘌呤碱基编辑，平均编辑百分比大于70％。 112.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1.5mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够在所述食蟹猴的肝脏中在所述ANGPTL3靶剪接位点处诱导腺嘌呤碱基编辑，平均编辑百分比大于80％。 113.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约3mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够在所述食蟹猴的肝脏中在所述ANGPTL3靶剪接位点处诱导腺嘌呤碱基编辑，平均编辑百分比大于40％。 114.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约3mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够在所述食蟹猴的肝脏中在所述ANGPTL3靶剪接位点处诱导腺嘌呤碱基编辑，平均编辑百分比大于50％。 115.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约3mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够在所述食蟹猴的肝脏中在所述ANGPTL3靶剪接位点处诱导腺嘌呤碱基编辑，平均编辑百分比大于60％。 116.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约3mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够在所述食蟹猴的肝脏中在所述ANGPTL3靶剪接位点处诱导腺嘌呤碱基编辑，平均编辑百分比大于70％。 117.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约3mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够在所述食蟹猴的肝脏中在所述ANGPTL3靶剪接位点处诱导腺嘌呤碱基编辑，平均编辑百分比大于80％。 118.如权利要求87-117所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中在给药后15天时经由所述猴的肝脏活检或尸检通过分析经给药的食蟹猴肝脏来确定所述编辑百分比。 119.如权利要求87-117所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中通过对经给药的所述食蟹猴进行定期肝脏活检测试确定了所述编辑百分比得以在给药后至少168天的跨度内持久地保持。 120.如权利要求87-117所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中通过对经给药的所述食蟹猴进行定期肝脏活检测试确定了所述编辑百分比得以在给药后至少300天的跨度内持久地保持。 121.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约0.5mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的ANGPTL3蛋白平均减少至少35％。 122.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约0.5mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的ANGPTL3蛋白平均减少至少40％。 123.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg猴重量约0.5mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的ANGPTL3蛋白平均减少至少50％。 124.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约0.5mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述猴的血浆中的ANGPTL3蛋白平均减少至少60％。 125.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约0.5mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的ANGPTL3蛋白平均减少至少70％。 126.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约0.5mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的ANGPTL3蛋白平均减少至少80％。 127.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的ANGPTL3蛋白平均减少至少35％。 128.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的ANGPTL3蛋白平均减少至少40％。 129.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg猴重量约1mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的ANGPTL3蛋白平均减少至少50％。 130.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的ANGPTL3蛋白平均减少至少60％。 131.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的ANGPTL3蛋白平均减少至少70％。 132.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的ANGPTL3蛋白平均减少至少80％。 133.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1.5mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的ANGPTL3蛋白平均减少至少35％。 134.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1.5mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的ANGPTL3蛋白平均减少至少40％。 135.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1.5mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的ANGPTL3蛋白平均减少至少50％。 136.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1.5mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的ANGPTL3蛋白平均减少至少60％。 137.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1.5mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的ANGPTL3蛋白平均减少至少70％。 138.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1.5mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的ANGPTL3蛋白平均减少至少80％。 139.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约3mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的ANGPTL3蛋白平均减少至少35％。 140.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约3mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的ANGPTL3蛋白平均减少至少40％。 141.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约3mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的ANGPTL3蛋白平均减少至少50％。 142.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约3mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的ANGPTL3蛋白平均减少至少60％。 143.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约3mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的ANGPTL3蛋白平均减少至少70％。 144.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约3mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的ANGPTL3蛋白平均减少至少80％。 145.如权利要求121-144所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中在给药后15天时通过对经给药的所述食蟹猴的血液采样和分析来确定血浆蛋白的所述减少。 146.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg猴重量约0.5mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述猴的血浆中的甘油三酯水平平均降低至少20％。 147.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约0.5mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的甘油三酯水平平均降低至少25％。 148.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约0.5mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的甘油三酯水平平均降低至少30％。 149.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约0.5mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的甘油三酯水平平均降低至少35％。 150.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约0.5mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的甘油三酯水平平均降低至少40％。 151.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约0.5mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的甘油三酯水平平均降低至少45％。 152.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的甘油三酯水平平均降低至少20％。 153.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的甘油三酯水平平均降低至少25％。 154.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的甘油三酯水平平均降低至少30％。 155.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的甘油三酯水平平均降低至少35％。 156.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的甘油三酯水平平均降低至少40％。 157.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的甘油三酯水平平均降低至少45％。 158.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的甘油三酯水平平均降低至少50％。 159.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的甘油三酯水平平均降低至少55％。 160.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的甘油三酯水平平均降低至少60％。 161.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1.5mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的甘油三酯水平平均降低至少20％。 162.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1.5mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的甘油三酯水平平均降低至少25％。 163.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1.5mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的甘油三酯水平平均降低至少30％。 164.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1.5mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的甘油三酯水平平均降低至少35％。 165.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1.5mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的甘油三酯水平平均降低至少40％。 166.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1.5mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的甘油三酯水平平均降低至少45％。 167.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1.5mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的甘油三酯水平平均降低至少50％。 168.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1.5mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的甘油三酯水平平均降低至少55％。 169.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1.5mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的甘油三酯水平平均降低至少60％。 170.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约1.5mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的甘油三酯水平平均降低至少65％。 171.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约3mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的甘油三酯水平平均降低至少20％。 172.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约3mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的甘油三酯水平平均降低至少25％。 173.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约3mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的甘油三酯水平平均降低至少30％。 174.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约3mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的甘油三酯水平平均降低至少35％。 175.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约3mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的甘油三酯水平平均降低至少40％。 176.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约3mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的甘油三酯水平平均降低至少45％。 177.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约3mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的甘油三酯水平平均降低至少50％。 178.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约3mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的甘油三酯水平平均降低至少55％。 179.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约3mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的甘油三酯水平平均降低至少60％。 180.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约3mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的甘油三酯水平平均降低至少65％。 181.如权利要求148-180所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中在给药后15天时通过对经给药的所述食蟹猴的血液采样和分析来确定甘油三酯水平的所述降低。 182.如权利要求148-180所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中通过对经给药的所述食蟹猴进行定期血液采样和分析确定甘油三酯水平的所述降低得以在至少168天的跨度内持久地保持。 183.如权利要求148-180所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中通过对经给药的所述食蟹猴进行定期血液采样和分析确定甘油三酯水平的所述降低得以在至少300天的跨度内持久地保持。 184.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约3mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的脂蛋白(a)平均减少至少10％。 185.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约3mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的脂蛋白(a)水平平均降低至少15％。 186.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约3mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的脂蛋白(a)水平平均降低至少20％。 187.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约3mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的脂蛋白(a)水平平均降低至少25％。 188.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约3mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的脂蛋白(a)水平平均降低至少30％。 189.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述组合物在以每kg食蟹猴重量约3mg的所述指导RNA和所述mRNA组合总重量的剂量通过静脉内输注施用于一组食蟹猴时能够与基线相比使经给药的所述食蟹猴的血浆中的脂蛋白(a)水平平均降低约35％。 190.如权利要求184-189所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中在给药后15天时通过对经给药的所述食蟹猴的血液采样和分析来确定脂蛋白(a)的所述减少。 191.如权利要求184-189所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中通过对经给药的所述食蟹猴进行定期血液采样和分析确定脂蛋白(a)的所述减少得以在至少224天的跨度内持久地保持。 192.如权利要求184-189所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中通过对经给药的所述食蟹猴进行定期血液采样和分析确定脂蛋白(a)的所述减少得以在至少300天的跨度内持久地保持。 193.如权利要求101-192所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中就对所述食蟹猴的给药导致AST、ALT或细胞因子升高而言，由所述组合物的给药引起的所述升高是短暂的并且在给药后3-15天内消退回至大约基线水平。 194.如权利要求101-103、121-126、148-153所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中ANGPTL3的编辑百分比在肝、脾和肾上腺组织之外是可忽略的，如图27所示。 195.如权利要求101-107、121-132、148-162所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中在ANGPTL3编辑百分比的编辑百分比方面，重复给药结果是相加的。 196.如权利要求195所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述重复给药不引起细胞因子激活，也不引起免疫应答。 197.如权利要求88所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述间隔子序列与所述ANGPTL3基因上的靶向的原间隔子的核苷酸序列具有至少80％的核苷酸相关性，其中如果所述间隔子序列上的RNA核苷酸与所述原间隔子的DNA核苷酸具有相同顺序的相同核苷酸，则所述RNA核苷酸与所述DNA核苷酸相关，并且其中出于确定相关性的目的将尿嘧啶碱基和胸腺嘧啶碱基认为是相同的核苷酸。 198.如权利要求197所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述间隔子序列与所述ANGPTL3基因上的靶向的原间隔子的核苷酸序列具有至少85％的核苷酸相关性。 199.如权利要求197所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述间隔子序列与所述ANGPTL3基因上的靶向的原间隔子的核苷酸序列具有至少90％的核苷酸相关性。 200.如权利要求197所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述间隔子序列与所述ANGPTL3基因上的靶向的原间隔子的核苷酸序列具有至少95％的核苷酸相关性。 201.如权利要求197所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述间隔子序列与所述ANGPTL3基因上的靶向的原间隔子的核苷酸序列具有至少99％的核苷酸相关性。 202.如权利要求197所述的用于编辑所述ANGPTL3基因的组合物，其中所述间隔子序列与所述ANGPTL3基因上的靶向的原间隔子的核苷酸序列具有至少100％的核苷酸相关性。 203.一种在有需要的对象中治疗或预防动脉粥样硬化性心血管疾病的方法，所述方法包括向所述对象施用治疗有效量的 (a)mRNA，所述mRNA编码具有编辑窗口的腺嘌呤碱基编辑器蛋白， (b)第一指导RNA，所述第一指导RNA包含tracr序列和间隔子序列，所述tracr序列用作所述碱基编辑器蛋白的结合支架，所述间隔子序列用于将所述碱基编辑器蛋白指引至PCSK9基因上的原间隔子序列，其中所述间隔子序列至少部分地与所述PCSK9基因的剪接位点或外显子区域互补；和 (c)第二指导RNA，所述第二指导RNA包含tracr序列和间隔子序列，所述tracr序列用作所述碱基编辑器蛋白的结合支架，所述间隔子序列用于将所述碱基编辑器蛋白指引至ANGPTL3基因上的原间隔子序列，其中所述间隔子序列至少部分地与所述ANGPTL3基因的剪接位点或外显子区域互补。 204.如权利要求203所述的方法，进一步包括包封(a)的第一LNP。 205.如权利要求204所述的方法，其中所述第一LNP包封(b)和(c)。 206.如权利要求204所述的方法，其中重复施用所述第一LNP。 207.如权利要求204所述的方法，其中以一至六十天的间隔重复施用所述第一LNP。 208.如权利要求204所述的方法，其中以七天的间隔重复施用所述第一LNP。 209.如权利要求204所述的方法，其中所述第一LNP进一步包封(b)。 210.如权利要求209所述的方法，进一步包括包封(a)和(c)的第二LNP。 211.如权利要求210所述的方法，其中顺序施用所述第一LNP和所述第二LNP。 212.如权利要求211所述的方法，其中以一天至12个月的间隔顺序施用所述第一LNP和所述第二LNP。 213.如权利要求212所述的方法，其中所述间隔是一天。 214.如权利要求212所述的方法，其中所述间隔是五天。 215.如权利要求212所述的方法，其中所述间隔是十天。 216.如权利要求212所述的方法，其中所述间隔是十五天。 217.如权利要求212所述的方法，其中所述间隔是二十天。 218.如权利要求212所述的方法，其中所述间隔是二十五天。 219.如权利要求212所述的方法，其中所述间隔是一个月。 220.如权利要求212所述的方法，其中所述间隔是两个月。 221.如权利要求212所述的方法，其中所述间隔是三个月。 222.如权利要求212所述的方法，其中所述间隔是五个月。 223.如权利要求212所述的方法，其中所述间隔是八个月。 224.如权利要求212所述的方法，其中所述间隔是十个月。 225.如权利要求212所述的方法，其中所述间隔是十二个月。