CRISPR-Cas9靶向敲除SLC30A1基因及其特异性的sgRNA
本发明公开了CRISPR/Cas9靶向敲除人乳腺癌细胞SLC30A1基因及其特异性sgRNA。首先是获得特异性靶向SLC30A1基因的sgRNA,其碱基序列如SEQ ID NO.1所示;其次是构建SLC30A1基因的sgRNA到慢病毒载体系统,该系统含有Cas9蛋白;最后将含有该sgRNA的CRISPR/Cas9慢病毒感染人乳腺癌细胞MDA‑MB‑231,获得SLC30A1蛋白表达水平显著降低的细胞株。本发明具有操作步骤简单、sgRNA靶向性好、且对SLC30A1基因切割效率高;此外,所构建的CRISPR/Cas9慢病毒系统具有敲除效率高的优势,并能特异性敲除SLC30A1基因,得到敲除SLC30A1基因的人乳腺癌细胞,从而为进一步研究乳腺癌细胞中SLC30A1的作用机制提供强有力的工具。
发明专利
CN201711282037.8
2017-12-07
CN108148835A
2018-06-12
C12N15/113(2010.01)I
和元生物技术(上海)股份有限公司
马佩敏;孙子豪;杨兴林;潘讴东
201321 上海市浦东新区紫萍路908弄19号楼
上海;31
一种CRISPR/Cas9 靶向敲除人乳腺癌细胞SLC30A1基因及其特异性的sgRNA,其特征在于,首先设计获得特异性靶向SLC30A1 基因的sgRNA;其次构建SLC30A1基因的sgRNA到慢病毒载体系统;然后将此慢病毒载体系统感染人乳腺癌细胞MDA‑MB‑231,得到的SLC30A1基因敲除细胞株。