DNA外切酶的应用及无缝克隆的方法

摘要：

本发明提供了DNA外切酶可以应用于DNA重组无缝克隆的应用；提供了一种试剂盒，可以用于DNA重组无缝克隆，DNA外切酶为T5核酸外切酶、T7核酸外切酶、核酸外切酶Ⅲ或Lambda核酸外切酶或其混合物；提供应用DNA外切酶的无缝克隆方法，通过PCR方法或者是限制性内切酶酶切法把载体线性化；在目的基因片段的两端通过PCR引入与载体两端分别同源的同源序列，得到扩增的目的基因片段；把经处理后的目的片段和经处理后的线性化载体混合后，加入DNA外切酶和反应液温浴，得到载体和片段混合物；使用得到的载体和片段混合物转化大肠杆菌感受态细胞。本应用和方法可以灵活的位点选择，可以在载体的任意位置进行基因克隆；10分钟完成载体构建快速简便，同时克隆精确而且效率高。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201710939294.8

申请日期：2017-10-11

公开/公告号：CN107760706A

公开/公告日：2018-03-06

主分类号：C12N15/70(2006.01)I

申请/专利权人:吴江近岸蛋白质科技有限公司

发明/设计人:赵曼曼;张清仪;金秋

主申请人地址:215200 江苏省苏州市吴江经济开发区科技创业园综合楼

专利代理机构:北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350

代理人:汤东凤

国别省市代码:江苏;32

权利要求：

DNA外切酶的应用，其特征在于：所述DNA外切酶应用于DNA重组无缝克隆。