CRISPER‑Cas9系统介导的山羊EDAR基因敲除的方法
本发明利用CRISPER‑Cas9系统介导完成山羊EDAR基因敲除的方法,其是依据山羊的<i>EDAR</i>基因序列,构建基于CRISPER‑Cas9系统的两个gRNA表达载体,然后将优化后的CRISPER‑Cas9载体和构建的gRNA表达载体共同转入山羊的胎儿成纤维细胞中,获得山羊EDAR基因敲除的细胞。本发明构建的CRISPER‑Cas9介导的打靶载体为山羊<i>EDAR</i>基因的敲除提供了一种简单快捷安全的途径。该方法在细胞系筛选过程中没有涉及任何筛选标记基因,从而大大提高了转基因动物的安全性,对山羊的遗传育种以及基因功能研究具有重要价值。
发明专利
CN201710437991.3
2017-06-12
CN106978445A
2017-07-25
C12N15/90(2006.01)I
内蒙古大学
刘东军;郝斐;闫玮
010021 内蒙古自治区呼和浩特市赛罕区大学西路235号
内蒙古;15
CRISPER‑Cas9系统介导的山羊EDAR基因敲除的方法,其特征在于,其是根据山羊的EDAR基因序列,构建基于CRISPER‑Cas9系统的两个gRNA表达载体,然后将优化后的CRISPER‑Cas9载体和上述构建的两个gRNA表达载体共同转入山羊的胎儿成纤维细胞中,获得山羊EDAR基因敲除的细胞系。