DNA文库的高效率构建

摘要：

本公开提供一种用于有效DNA文库构建以及所述文库的靶向遗传分析的方法。文库可用于预测、诊断或监测受试者的遗传疾病。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201680076637.6

申请日期：2016-11-10

公开/公告号：CN108431233A

公开/公告日：2018-08-21

主分类号：C12Q1/6806(2018.01)I

申请/专利权人:分析生物科学有限公司

发明/设计人:克里斯多弗·K·雷蒙德;林继力

主申请人地址:美国华盛顿州

专利代理机构:北京英赛嘉华知识产权代理有限责任公司 11204

代理人:王达佐%洪欣

国别省市代码:美国;US

权利要求：

1.一种提高衔接子连接至一个或多个DNA片段的效率的方法，所述方法包括：(a)除去一个或多个DNA片段的末端磷酸酯残基；(b)用一种或多种末端修复酶处理所述去磷酸化的DNA片段以产生末端修复的DNA；(c)将一个或多个双链DNA(dsDNA)前衔接子连接至所述末端修复的DNA的每条链的3'末端以形成前衔接子/末端修复的DNA复合物，其中每个dsDNA前衔接子包含连接至所述末端修复的DNA的每条链的3'末端的连接链寡核苷酸，和非连接配偶体链寡核苷酸；(d)用修复寡核苷酸置换来自所述前衔接子/末端修复的DNA复合物的所述非连接配偶体链寡核苷酸以形成衔接子/末端修复的DNA复合物，其中每个衔接子包含所述连接链寡核苷酸和所述修复寡核苷酸；以及(e)用一种或多种酶处理所述衔接子/末端修复的DNA复合物以形成连续的双链DNA文库；其中与将去磷酸化的衔接分子连接至磷酸化的DNA片段的方法相比，衔接子连接的效率提高。