ALDC 生产方法

摘要：

本披露提供包含ALDC酶的方法、组合物、装置和试剂盒，所述ALDC酶具有更好的稳定性和活性，并且此外能以提高的产量从微生物中回收所述ALDC酶。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201680029408.9

申请日期：2016-05-18

公开/公告号：CN107667172A

公开/公告日：2018-02-06

主分类号：C12N9/88(2006.01)I

申请/专利权人:杜邦营养生物科学有限公司

发明/设计人:J·F·克拉米尔;L·B·詹森;A·H·凯利特-史密斯;B·拉尔森

主申请人地址:丹麦哥本哈根

专利代理机构:北京市中咨律师事务所 11247

代理人:史文静%黄革生

国别省市代码:丹麦;DK

权利要求：

一种用于生产乙酰乳酸脱羧酶(ALDC)的方法，所述方法包括：A i)提供包含遗传改变的芽孢杆菌属(Bacillus)宿主细胞，与亲本细胞相比，所述遗传改变导致所述宿主细胞产生减少的量的内源胞外丝氨酸蛋白酶(vpr)和/或细胞壁蛋白酶(wprA)，其中用与启动子有效组合的编码异源ALDC酶的核酸转化所述宿主细胞；以及ii)在适合于产生所述异源ALDC酶的条件下培养所述宿主细胞，使得产生所述异源ALDC酶；或者B i)提供包含遗传改变的芽孢杆菌属宿主细胞，与亲本细胞相比，所述遗传改变导致所述宿主细胞产生减少的量的内源胞外丝氨酸蛋白酶(vpr)和/或细胞壁蛋白酶(wprA)，其中用核酸转化所述宿主细胞，与亲本细胞相比，所述核酸导致所述宿主细胞过量表达编码ALDC酶的内源核酸序列；以及ii)在适合于产生ALDC酶的条件下培养所述宿主细胞，使得产生ALDC酶。