NRAS基因的突变位点的检测方法

摘要：

一种NRAS基因的突变位点的检测方法，包括以下步骤：(S10)进行一聚合酶连锁反应(PCR)，扩增包含所述突变位点的核酸片段；(S20)进行去磷酸化反应；(S30)进行一延伸反应，其中使用延伸引子辨识所述突变位点的位置，并在所述延伸引子的3’端延伸与所述突变位点的碱基互补的单一核苷酸，而获得被延伸的延伸引子；(S40)进行纯化反应；以及(S50)以质谱仪检测所述被延伸的延伸引子的分子量大小，根据所述分子量大小决定所述突变位点的基因型。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201610565963.5

申请日期：2016-07-18

公开/公告号：CN107630076A

公开/公告日：2018-01-26

主分类号：C12Q1/6858(2018.01)I

申请/专利权人:丰技生物科技股份有限公司

发明/设计人:张宏名;林建兴;张书铭

主申请人地址:中国台湾台北市中正区忠孝西路二段80号3楼

专利代理机构:上海翼胜专利商标事务所(普通合伙) 31218

代理人:翟羽

国别省市代码:台湾;71

权利要求：

一种NRAS基因的一突变位点的检测方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：(S10)对一待测检体进行一聚合酶连锁反应(PCR)，其中使用一对扩增引子，扩增所述待测检体中包含所述突变位点的一段核酸片段，而获得一被扩增的核酸片段；(S20)对所述被扩增的核酸片段进行去磷酸化反应，以去除用于所述聚合酶连锁反应的核苷酸材料5’端的磷酸根；(S30)对所述被扩增的核酸片段进行一延伸反应，其中使用一延伸引子辨识所述突变位点的位置，并在所述延伸引子的3’端延伸与所述突变位点的碱基互补的单一核苷酸，而获得一被延伸的延伸引子；(S40)进行纯化反应，以纯化所述被延伸的延伸引子；以及(S50)以一质谱仪检测所述被延伸的延伸引子的分子量大小，根据所述分子量大小决定所述被延伸的单一核苷酸的碱基种类，从而决定所述突变位点的基因型；其中所述延伸引子包括选自于SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17与SEQ ID NO:18所组成的一群组中的一者。