CIK及其制备方法

摘要：

本发明提供一种CIK制备方法及由该方法制备的CIK，方法包括：获取单个核细胞，并用400～600U/mL的r-干扰素进行初次诱导培养后、继续第二次诱导培养和第三次诱导培养；其中，第二次诱导培养于200～300U/mL的r-干扰素、90～110ng/mL的CD3单抗、90～110ng/mL的CD28单抗、8～12ng/mL的IL-1a和450～550U/mL的IL-2条件进行；第三次诱导培养于40～60U/mL的r-干扰素、15～25ng/mL的CD3单抗、15～25ng/mL的CD28单抗、3.2～4.8ng/mL的IL-1a、450～550U/mL的IL-2和450～550U/mL的IL-15条件进行。本发明用不同条件进行分步诱导，使细胞性状稳定，从而最终收获到增值倍数较高的性状多样稳定的CIK细胞。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201510425461.8

申请日期：2015-07-17

公开/公告号：CN105154398A

公开/公告日：2015-12-16

主分类号：C12N5/0783(2010.01)I

申请/专利权人:深圳爱生再生医学科技有限公司

发明/设计人:曾宪卓;成杰

主申请人地址:518057 广东省深圳市南山区高新区南环路29号留学生创业大厦15楼02号

国别省市代码:广东;44

权利要求：

一种CIK制备方法，其特征在于，包括如下步骤：获取单个核细胞；将所述单个核细胞用400～600U/mL的r?干扰素进行初次诱导培养；将所述初次诱导培养后的细胞进行第二次诱导培养；其中，该第二次诱导培养于200～300U/mL的r?干扰素、90～110ng/mL的CD3单抗、90～110ng/mL的CD28单抗、8～12ng/mL的IL?1a和450～550U/mL的IL?2条件下进行；将所述第二次诱导培养后的细胞进行第三次诱导培养；其中，该第三次诱导培养于40～60U/mL的r?干扰素、15～25ng/mL的CD3单抗、15～25ng/mL的CD28单抗、3.2～4.8ng/mL的IL?1a、450～550U/mL的IL?2和450～550U/mL的IL?15条件下进行。