L-鸟氨酸酶法转化制备方法

摘要：

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种L-鸟氨酸酶法转化制备方法。该制备方法采用含有精氨酸的料液或精氨酸粗品或精氨酸盐粗品为底物配制酶转化液，加入具有精氨酸酶活性的菌体细胞或酶粗提液，在25～55℃、pH 7～11条件下进行酶促反应，利用等电点结晶和离子交换相结合的方法分离制备转化产物L-鸟氨酸盐酸盐。该方法以廉价的L-精氨酸料液为底物酶法合成了附加值较高的L-鸟氨酸盐酸盐，具有原料来源广，酶促转化效率高，操作简便，生产成本低等优点。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201510287808.7

申请日期：2015-06-01

公开/公告号：CN104830922A

公开/公告日：2015-08-12

主分类号：C12P13/10(2006.01)I

申请/专利权人:南京大学

发明/设计人:焦庆才;刘均忠;高亮;陆阳;刘茜

主申请人地址:210093 江苏省南京市鼓楼区汉口路22号

专利代理机构:南京知识律师事务所 32207

代理人:胡锡瑜

国别省市代码:江苏;32

权利要求：

一种L‑鸟氨酸酶法转化制备方法，其特征是由以下步骤构成：(1)将具有精氨酸酶活性的菌株粪肠球菌或产碱杆菌或芽孢杆菌或栖息微球菌在培养基中培养，培养基碳源采用葡萄糖、麦芽糖、蔗糖和/或果糖，培养基中总碳源质量浓度为1～30g/L；氮源采用牛肉膏、酵母膏、玉米浆、蛋白胨和/或豆饼水解液，培养基中总氮源质量浓度为1～30g/L，产生高酶活精氨酸酶；(2)将含有精氨酸质量浓度为10～150g/L的精氨酸发酵液，或含有精氨酸质量浓度为10～150g/L的精氨酸离子交换洗脱液，或精氨酸重量比含量为50％～95％的精氨酸粗品或精氨酸盐粗品，加水配制成底物溶液，配制的粗品底物水溶液质量浓度为50～200g/L，用氨水或无机酸调pH7～11，加入精氨酸酶细胞或酶粗提液，再加入表面活性剂吐温‑80或十六烷基三甲基溴化铵或TritonX‑100或聚乙二醇辛基苯基醚，其终浓度为0.1～1.0g/L，在25～55℃条件下进行酶促反应，转化反应结束后利用等电点结晶和离子交换相结合的方法分离制备转化产物L‑鸟氨酸盐酸盐。