KRAS基因多点突变单管快速检测方法及试剂盒

摘要：

本发明公开了多点突变单管快速检测方法及试剂盒。多点突变单管快速检测方法，包括：1）设计ARMS引物及对应的下游引物、中介连接引物、通用荧光探针及其淬灭探针；2）将ARMS引物及对应的下游引物、中介连接引物、通用荧光探针及其淬灭探针与热启动快速Taq酶系统混合，扩增；3）检测反应体系的荧光变化，确定是否存在点突变。本发明的发明，操作简单，可以定性检测出多点突变的存在。本发明的检测方法中使用的引物设计难度低，大幅降低了引物合成的成本；克服了现有ARMS技术的局限性，大大提高了其检测通量；实现了1管反应取代了之前的多管检测，节省人力物力。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201510211543.2

申请日期：2015-04-29

公开/公告号：CN104830981A

公开/公告日：2015-08-12

主分类号：C12Q1/68(2006.01)I

申请/专利权人:广州和实生物技术有限公司

发明/设计人:陈华云;陈嘉昌;刘淑园;肖湘文;丁渭;张天海;赵丽;方凤银;邓利琼

主申请人地址:510665 广东省广州市经济技术开发区科学城荔枝山路6号1号楼510室

国别省市代码:广东;44

权利要求：

多点突变单管快速检测方法，包括如下步骤：a)设计针对不同点突变的ARMS引物及对应的下游引物、中介连接引物和通用荧光探针，其中，中介连接引物由与通用荧光探针部分序列互补的通用序列部分和与点突变下游的部分序列互补的特异部分组成；b)将ARMS引物及对应的下游引物、中介连接引物和通用荧光探针与快速Taq酶系统混合，扩增；c)检测反应体系的荧光变化，确定是否存在点突变。