G6PD缺陷型Caki-1稳转细胞株及其构建方法

摘要：

本发明涉及医学分子生物学相关技术，尤其是采用siRNA干扰技术构建细胞研究模型。本发明所述的G6PD缺陷型Caki-1稳转细胞株是含有靶向干扰G6PD基因表达的DNA双链片段和绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因、可将Caki-1细胞株经siRNA干扰技术靶向沉默了内源性G6PD表达量80％以上的稳转细胞株；所述的DNA双链片段为：干扰F链5'-GATCCCCGCCTCAGTGCCACTTGACATTCAAGAGATGTCAAGTGGCACTGAGGCTTTTTTA-3'和干扰R链5'-AGCTTAAAAAAGCCTCAGTGCCACTTGACATCTCTTGAATGTCAAGTGGCACTGAGGCGGG-3'。本申请应用siRNA干扰技术沉默人肾透明细胞癌Caki-1细胞内源性G6PD表达80％以上，构建了G6PD缺陷型Caki-1稳转细胞株(Caki-1-G6PD siRAN)。这一细胞模型可用于探究G6PD与肾细胞癌的相关性，以及G6PD在肾细胞癌发生发展中的具体作用及相关调控机制。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201410795517.4

申请日期：2014-12-19

公开/公告号：CN104560880A

公开/公告日：2015-04-29

主分类号：C12N5/10(2006.01)I

申请/专利权人:昆明医科大学

发明/设计人:朱月春;况应敏;张巧;王艳玲;杨丽娟;陈龙;韩巧巧

主申请人地址:650000 云南省昆明市呈贡新城雨花街道春融西路1168号

专利代理机构:云南派特律师事务所 53110

代理人:张怡

国别省市代码:云南;53

权利要求：

一种G6PD缺陷型Caki‑1稳转细胞株，其特征在于是含有靶向干扰G6PD基因表达的DNA双链片段和绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因、可将Caki‑1细胞株经siRNA干扰技术靶向沉默了内源性G6PD表达量80％以上的稳转细胞株；所述的DNA双链片段为：干扰F链5'‑GATCCCCGCCTCAGTGCCACTTGACATTCAAGAGATGTCAAGTGGCACTGAGGCTTTTTTA‑3'和干扰R链5'‑AGCTTAAAAAAGCCTCAGTGCCACTTGACATCTCTTGAATGTCAAGTGGCACTGAGGCGGG‑3'。