BUD13-ZNF259基因单核苷酸多态性的检测方法、试剂盒和应用

摘要：

本发明涉及一种用Tm-shift法检测BUD13-ZNF259基因rs964184单核苷酸多态性的方法，在特异性引物5′端分别加入富含GC的序列，3′末端的碱基与SNP的等位基因变异体配对。在上述引物的存在下，在荧光PCR仪中，对血清样品提取的DNA进行PCR扩增，利用熔解曲线分析PCR产物，根据PCR产物的Tm值来判断基因型。该引物可用于制备检测冠心病易感性的试剂盒。本发明的Tm-shift法操作简便，准确度高，重复性好，成本低廉，可用于促进疾病的早期预防和为用药治疗提供参考。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201310613783.6

申请日期：2013-11-26

公开/公告号：CN104673882A

公开/公告日：2015-06-03

主分类号：C12Q1/68(2006.01)I

申请/专利权人:宁波大学

发明/设计人:李奕润;段世伟;叶华丹;周安楠

主申请人地址:315211 浙江省宁波市江北区风华路818号

专利代理机构:上海伯瑞杰知识产权代理有限公司 31227

代理人:吴瑾瑜

国别省市代码:浙江;33

权利要求：

BUD13‑ZNF259基因单核苷酸多态性的检测方法，其特征在于，所述的单核苷酸多态性为rs964184，步骤包括：（1）用以下引物对样品DNA进行PCR扩增，引物是包括以下序列的核苷酸片段：（a）特异性上游引物1：5’‑gcgggcagggcggctcaccatctgatgtactgttttcctc‑3’；（b）特异性上游引物2：5’‑gattaccgTCACCATCTGATGTACTGTTTTCCTg‑3’；（c）反向测序引物5’‑TTCATGGAACTTGAAGTCTAGTGGGGA‑3’；（2）PCR产物用荧光定量PCR仪分析熔解曲线，并与用步骤（1）的方法扩增标准样品所制作标准熔解曲线比较，对比PCR产物的Tm值，获得相应的基因分型结果。