D-叔亮氨酸的一种生物催化制备方法

摘要：

本发明公开了一种新的利用来源于Symbiobacterium thermophilum内消旋-二氨基庚二酸脱氢酶(StDAPDH)突变体生物催化剂来还原氨化合成光学纯D-叔亮氨酸的方法。其特征在于将StDAPDH蛋白质序列的121位或在同源性比较相当于121位的色氨酸(W)替换为亮氨酸(L)，146位或在同源性比较相当于146位的苯丙氨酸(F)替换为亮氨酸(L)，227位或在同源性比较相当于227位的组氨酸(H)替换为苯丙氨酸(F)，并将这三个位点突变组合成三突变体。利用三突变体纯酶建立催化反应体系，配合辅酶NADPH循环体系，还原氨化合成光学纯D-叔亮氨酸，所合成D-叔亮氨酸产物的ee值大于99％。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201310459718.2

申请日期：2013-09-30

公开/公告号：CN104513839A

公开/公告日：2015-04-15

主分类号：C12P13/06(2006.01)I

申请/专利权人:中国科学院天津工业生物技术研究所

发明/设计人:刘卫东;朱敦明;吴洽庆;陈曦;冯进辉;马延和

主申请人地址:300308 天津市空港经济区西七道32号

国别省市代码:天津;12

权利要求：

一种利用内消旋‑二氨基庚二酸脱氢酶突变体作为生物催化剂来合成光学纯度＞99％D‑叔亮氨酸的方法，包括：对内消旋‑二氨基庚二酸脱氢酶StDAPDH进行组合突变，以获得的组合突变体为生物催化剂，以3，3‑二甲基‑2‑羰基丁酸与氯化铵作为底物构成的反应体系，加入辅酶循环体系进行催化还原胺化反应，制得光学纯度＞99％的D‑叔亮氨酸。