FRET原理的5-羟甲基胞嘧啶的荧光检测方法
本发明提供一种FRET原理的5-羟甲基胞嘧啶的荧光检测方法,包括如下步骤:先用高钌酸钾将DNA中的5-羟甲基胞嘧啶氧化成5醛基胞嘧啶;再用带荧光的BODIPY化合物与DNA中的5醛基胞嘧啶反应;最后加入阳离子荧光聚合物,通过荧光检测来定量DNA中5羟甲基胞嘧啶的含量。该检测方法具有简单快速,成本较低的优点。
发明专利
CN201310263449.2
2013-06-27
CN103305621A
2013-09-18
C12Q1/68(2006.01)I
武汉大学
周翔;王天露;洪婷婷;郭璞
430072 湖北省武汉市武昌区珞珈山武汉大学
武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222
张火春
湖北;42
FRET原理的5‑羟甲基胞嘧啶的荧光检测方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)用高钌酸钾将DNA中的5羟甲基胞嘧啶氧化成5醛基胞嘧啶;(2)用带荧光的BODIPY化合物与DNA中的5醛基胞嘧啶反应:以回香胺为催化剂,在pH=5的醋酸铵缓冲溶液中带荧光的BODIPY化合物与含醛基的DNA在37℃条件下反应12h,用氯仿萃取产物;(3)加入阳离子荧光聚合物,通过荧光检测来定量DNA中5羟甲基胞嘧啶的含量:将阳离子荧光聚合物加入到步骤(2)中的产物中,震荡离心,以380nm为发射波长,通过检测荧光强度来定量5羟甲基胞嘧啶的含量。