L-酪氨酸酶法转化制备方法

摘要：

本发明提供了一种L-酪氨酸酶法转化制备方法。所述方法的步骤为：1、将有丝氨酸脱氨酶活性和酪氨酸酚裂解酶活性的菌株分别在培养基中培养备用；2、将所述两种细胞与含L-丝氨酸的氨基酸料液混合，加入500g/L的苯酚水溶液，以及浓度为0.2g/L磷酸吡哆醛和浓度为0.01-1.0g/L的表面活性剂，在25～55℃，用体积百分比为25%的氨水调节pH值为6～11的条件下酶促反应6-35小时；3、将转化液在4000转/分钟离心15分钟，收集混合物，用200-7000ml纯水溶解混合物，滴加10mol/L的氢氧化钠调节pH值至12-13，搅拌升温至80℃，滤液用6mol/L的盐酸调节pH值至6，烘干后获得所需的L-酪氨酸。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201310168119.5

申请日期：2013-05-09

公开/公告号：CN103224972A

公开/公告日：2013-07-31

主分类号：C12P39/00(2006.01)I

申请/专利权人:湖北新生源生物工程股份有限公司

发明/设计人:肖国安;王先兵;焦庆才;刘均忠;章平

主申请人地址:434300 湖北省荆州市公安县斗湖堤镇孱陵大道666号

专利代理机构:荆州市技经专利事务所 42219

代理人:韩志刚

国别省市代码:湖北;42

权利要求：

一种L?酪氨酸酶法转化制备方法，其特征在于：所述方法按以下步骤进行：（1）将具有丝氨酸脱氨酶活性和酪氨酸酚裂解酶活性的菌株分别在培养基中培养，产生高酶活丝氨酸脱氨酶和酪氨酸酚裂解酶备用；（2）采用游离细胞法，将丝氨酸脱氨酶细胞和酪氨酸酚裂解酶细胞与含L?丝氨酸的氨基酸料液混合，再加入17?616ml浓度为500g/L的苯酚水溶液，维持溶液中苯酚含量为10g/L，以及浓度为0.2g/L磷酸吡哆醛和浓度为0.01?1.0g/L的表面活性剂，在温度为25～55℃，用体积百分比为25%的氨水调节pH值为?6～11的条件下进行酶促反应，反应时间为6?35小时，反应结束后，转化液中的L?酪氨酸的浓度为16.3?589.6g/L；（3）将步骤（2）获取的转化液放入离心机，在转速为4000转/分钟离心分离15分钟，收集湿细胞和固体L?酪氨酸混合物，用200?7000ml纯水溶解固体混合物，然后滴加浓度为10mol/L的氢氧化钠调节pH值至12?13，搅拌升温至80℃，将固体混合物完全溶解，加入活性炭脱色除去菌体细胞，将溶液过滤，滤液用浓度为6mol/L的盐酸调节pH值至6，冷却结晶，真空抽滤，用纯水洗涤产品，烘干后获得所需的L?酪氨酸。