JAM1基因修饰间充质干细胞的方法及其应用
本发明涉及干细胞及基因工程技术领域。本发明提供了一种链接粘附分子JAM1基因修饰间充质干细胞的方法，具体为设计引物，以人表皮细胞总RNA为模板，通过RT-PCR扩增，制备JAM1cDNA，再构建重组人peGFP-N1-JAM1真核表达载体，为提高转染效率，构建慢病毒过表达质粒pGC-FU-JAM1-GFP；将慢病毒感染人胚源性间充质干细胞（hMSC）。本发明还提供了上述方法在制备促进毛发再生的干细胞和细胞移植促进局部皮肤毛发再生中的应用。本发明的JAM1ov-hMSC皮内移植到3周龄裸鼠皮肤组织，在裸鼠皮肤微环境的诱导下，JAM1ov-hMSC迁移到裸鼠毛囊，使裸鼠毛囊生长期延长，毛囊结构改善，毛发再生。
发明专利
CN201210532533.5
2012-12-11
CN103031278A
2013-04-10
C12N5/10(2006.01)I
中国人民解放军第二军医大学
刘厚奇;仵敏娟;郭晓灿
200433 上海市杨浦区翔殷路800号
上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268
赵青
上海;31
一种链接粘附分子JAM1基因修饰间充质干细胞的方法，包括以下步骤：A、设计并合成引物如下：上游引物如SEQ??ID??NO:1所示，下游引物如SEQ??ID??NO:2所示；以人表皮细胞总RNA为模板，通过RT??PCR扩增，制备JAM1cDNA序列如SEQ??ID??NO:3所示；B、构建慢病毒过表达质粒pGC??FU??JAM1??GFP；C、将慢病毒过表达质粒pGC??FU??JAM1??GFP颗粒感染人早胚来源的间充质干细胞，获得JAM1高表达的人早胚来源的间充质干细胞，即JAM1ov??hMSC。