PCR-焦磷酸法检测副溶血弧菌的检测引物、试剂盒和检测方法

摘要：

本发明公开了一种PCR-焦磷酸法检测副溶血弧菌的检测引物、试剂盒和检测方法。本发明根据副溶血弧菌toxR基因(GenBank:NC_004603.1)序列中的保守区域，用PyroMark?Assay?Design软件设计PCR引物和测序引物，建立了PCR-焦磷酸测序，从DNA碱基序列水平上检测副溶血弧菌的方法。本发明先对目标片段进行PCR扩增，保证扩增片段的特异性，再用扩增产物制备单链模板，在测序引物的引导下进行焦磷酸测序。检测的所得碱基序列，用NCBI网站的BLAST功能反复比对时发现，toxR基因测序引物后的碱基序列具有良好的特异性，测序引物后34bp连续DNA序列为：CCAAGGATTCACAGCAGAAGCCACAGGTGCTTTT的就可鉴定含有VP。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201210272737.X

申请日期：2012-08-01

公开/公告号：CN102808024A

公开/公告日：2012-12-05

主分类号：C12Q1/68(2006.01)I

申请/专利权人:许龙岩%袁慕云%曹际娟%唐勤%邹志飞

发明/设计人:许龙岩;袁慕云;曹际娟;唐勤;邹志飞

主申请人地址:510623 广东省广州市珠江新城花城大道66号B1405室

专利代理机构:广州科粤专利商标代理有限公司 44001

代理人:刘明星

国别省市代码:广东;44

权利要求：

一种PCR?焦磷酸法检测副溶血弧菌的检测引物，其特征在于，包括PCR引物和测序引物：PCR引物：上游引物F：GAGATTCCGCTGGGTTTGTAA；下游引物R：TGAACCAGAAGCGCCAGTAGTAC；测序引物S：AAATAACGCGTGGAAT。