6种食源性致病菌的GeXP多重快速检测用引物和检测方法

摘要：

本发明涉及常见食源性致病菌同步检测方法，特别是涉及一种基于GenomeLabTMGeXP多重基因表达分析技术的致病菌多重PCR快速检测方法，属于生物技术领域。本发明将特异性引物与通用性引物扩增相结合，PCR扩增的前16个循环采用较高的退火温度进行特异性引物的扩增，后16个循环中，通用引物进行大规模的通用性扩增，检测结果采用遗传分析系统的片段分析功能根据核酸片段长度的荧光信号进行自动化读取和分析，可同时实现对较多样品量的检测，有效地避免了普通多重PCR扩增出现的引物间的竞争效应。本发明旨在建立一种快速、高通量、高可靠性、高灵敏度的食源性致病菌的检测方法。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201210125861.3

申请日期：2012-04-26

公开/公告号：CN102618662A

公开/公告日：2012-08-01

主分类号：C12Q1/68(2006.01)I

申请/专利权人:重庆出入境检验检疫局检验检疫技术中心%肖进文

发明/设计人:肖进文;刘生峰;周蓓莉;周庆;杨俊;李应国;王昱;聂福平

主申请人地址:400020 重庆市江北区红黄路8号

专利代理机构:重庆市恒信知识产权代理有限公司 50102

代理人:刘小红

国别省市代码:重庆;85

权利要求：

一种采用6种食源性致病菌的GeXP多重快速检测用引物，其特征在于：包括6对特异性引物，1对阳性对照引物和1对通用引物，它们的核苷酸序列如下：空肠曲杆菌特异性引物:上游SEQ?ID?NO1，下游SEQ?ID?NO2；金黄色葡萄球菌特异性引物：上游SEQ?ID?NO3，下游SEQ?ID?NO4；肠出血性大肠杆菌O157:?H7特异性引物：上游SEQ?ID?NO5，下游SEQ?ID?NO6；志贺氏菌特异性引物：上游SEQ?ID?NO7，下游SEQ?ID?NO8；沙门氏菌特异性引物：上游SEQ?ID?NO9，下游SEQ?ID?NO10；单核细胞增生李斯特氏菌特异性引物：上游SEQ?ID?NO11，下游SEQ?ID?NO12；阳性对照引物：上游SEQ?ID?NO13，下游SEQ?ID?NO14；通用引物：上游SEQ?ID?NO15，下游SEQ?ID?NO16。