H9N2亚型禽流感病毒标准样品的制备方法

摘要：

本发明公开一种H9N2亚型禽流感病毒标准样品的制备方法，按如下步骤进行：a.将H9N2亚型禽流感病毒株用生理盐水作10倍连续稀释至10-8，每个稀释度接种5枚10日龄SPF鸡胚，每胚0.1ml，接种后置于37℃继续孵育，每日照蛋；b.逐个收获接种72~120h死亡鸡胚及120h活胚的尿囊液，分别测定每个鸡胚尿囊液的HA价，并以最高稀释度病毒感染的一枚鸡胚中的尿囊液作为传代接种物；c.依次重复a、b步骤两次，重复过程中a步骤的H9N2亚型禽流感病毒株为b步骤所产生的传代接种物；d.将最后一次b步骤所产生的传代接种物用生理盐水作10倍稀释，10倍稀释液接种于10枚10～11日龄SPF鸡胚的尿囊腔内，接种后继续孵育，每日照蛋，收获接种72～120h死亡鸡胚尿囊液，分装安瓿，-80℃温度保存。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201210082755.1

申请日期：2012-03-27

公开/公告号：CN102634488A

公开/公告日：2012-08-15

主分类号：C12N7/00(2006.01)I

申请/专利权人:大连民族学院

发明/设计人:杜雄伟;李叶

主申请人地址:116000 辽宁省大连市开发区辽河西路18号

专利代理机构:大连非凡专利事务所 21220

代理人:闪红霞

国别省市代码:辽宁;21

权利要求：

一种H9N2亚型禽流感病毒标准样品的制备方法，其特征在于按如下步骤进行：a.?将H9N2亚型禽流感病毒株用生理盐水作10倍连续稀释至10?8，每个稀释度接种5枚10日龄SPF鸡胚，每胚0.1?ml，接种后置于37℃继续孵育，每日照蛋；b.?逐个收获接种72~120h死亡鸡胚及120?h活胚的尿囊液，分别测定每个鸡胚尿囊液的HA价，并以最高稀释度病毒感染的一枚鸡胚中的尿囊液作为传代接种物；c.?依次重复a、b步骤两次，重复过程中a步骤的H9N2亚型禽流感病毒株为b步骤所产生的传代接种物；d.?将最后一次b步骤所产生的传代接种物用生理盐水作10倍稀释，将10倍稀释液接种于10枚10～11日龄SPF鸡胚的尿囊腔内，接种后继续孵育，每日照蛋，收获接种72～120?h死亡鸡胚尿囊液，分装安瓿，?80℃温度保存。