BCL2基因3-UTR双荧光素酶报告基因质粒及其构建方法和用途

摘要：

本发明属生物技术领域，涉及BCL2基因3-UTR双荧光素酶报告基因质粒及其构建方法。本发明通过将凋亡抑制基因BCL2的3-UTR区域插入双荧光素酶报告质粒pGL3-promoter的Xba??I位点，构建包含BCL2的3-UTR区域的双荧光素报告基因质粒pGL3-p-BCL2-3-UTR，用于检测hsa-mir-1915对BCL2基因的调控作用，从而便于对细胞内microRNA调控的检测。本发明检测细胞内hsa-mir-1915的表达，从而标示细胞内特异的microRNA表达水平，为细胞内microRNA检测提供新的研究方法；所构建的BCL2基因的3-UTR区双荧光素酶报告基因质粒可用于检测细胞内hsa-mir-1915对BCL2基因的调控作用；进一步用于microRNA的抗肿瘤研究中，具有极佳的应用前景。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201110325905.2

申请日期：2011-10-21

公开/公告号：CN103060355A

公开/公告日：2013-04-24

主分类号：C12N15/63(2006.01)I

申请/专利权人:上海中医药大学附属普陀医院%华东理工大学

发明/设计人:范忠泽;肖海娟;许建华;刘建文;孙珏;崔大苓;徐可;梁欣;李琦;殷佩浩;高虹;赵成根;陆海;金泉克;王国娟;余文燕;朱晏伟;张勇

主申请人地址:200062 上海市兰溪路164号

专利代理机构:上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268

代理人:吴桂琴

国别省市代码:上海;31

权利要求：

一种凋亡抑制基因BCL2的3??UTR区双荧光素酶报告基因质粒，其特征是，通过下述方法构建：根据生物信息学数据库miRDB预测hsa??mir??1915与BCL2结合的靶位点，将其中的包含人BCL2基因的3??UTR区的序列扩增，插入双荧光素酶报告基因质粒pGL3??promoter的Xba??I位点，构建BCL2的3??UTR区双荧光素酶报告基因质粒；所述的BCL2基因的3??UTR区具有序列1的结构。