PCV2、PRV与SIV H9亚型多重SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR引物及其检测方法

摘要：

本发明公开了一种PCV2、PRV与SIV?H9亚型多重SYBR?Green?Ⅰ实时荧光PCR引物及其检测方法，SIV?H9亚型引物的序列如下：上游引物P1：5′-GGAACAACGCTTACCCTG-3′；下游引物P2：5′-GAGACCATTGACAAGAGGC-3′；PRV引物的序列如下：上游引物P3：5′-GGCATCGGCGACTACCT-3′；下游引物P4：5′-CGTCGTGCAGCGTGTAGAG-3′；PCV2引物的序列如下：上游引物P5：5′-GGGCCAGAATTCAACCTTACCC-3′；下游引物P6：5′-CGCACCTTCGGATATACTGTCA-3′。本发明分别设计扩增SIV?H9亚型、PCV2和PRV的特异性引物，通过三重SYBR?Green?Ⅰ实时定量PCR检测方法能够同时检测SIV?H9亚型、PCV2和PRV。SIV?H9亚型、PCV2和PRV同时检出的极限拷贝数分别为184拷贝/μL，207拷贝/μL，193拷贝/μL。本发明的特异性试验结果良好，只出现三个特异性的峰值，重复性试验具有很好的稳定性并且本试验的最大优势在于能够同时检测SIV?H9亚型、PCV2和PRV3种DNA病毒，有利于妊娠母猪繁殖障碍性病毒的鉴别。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201110221752.7

申请日期：2011-08-04

公开/公告号：CN102373299A

公开/公告日：2012-03-14

主分类号：C12Q1/70(2006.01)I

申请/专利权人:河南农业大学

发明/设计人:魏战勇;李明凤;陈红英;宋亚鹏;韩志涛;崔保安

主申请人地址:450002 河南省郑州市文化路95号

专利代理机构:郑州中原专利事务所有限公司 41109

代理人:张绍琳

国别省市代码:河南;41

权利要求：

PCV2、PRV与SIV?H9亚型多重SYBR?Green?Ⅰ实时荧光PCR引物，其特征在于：SIV?H9亚型引物的序列如下：上游引物P1：5′?GGAACAACGCTTACCCTG?3′；下游引物P2：5′?GAGACCATTGACAAGAGGC?3′；PRV引物的序列如下：上游引物P3：5′?GGCATCGGCGACTACCT?3′；下游引物P4：5′?CGTCGTGCAGCGTGTAGAG?3′；PCV2引物的序列如下：上游引物P5：5′?GGGCCAGAATTCAACCTTACCC?3′；下游引物P6：5′?CGCACCTTCGGATATACTGTCA?3′。