CCR5缺失型的造血干细胞及其制备方法与应用
本发明公开一种制备自体CCR5缺失的造血干细胞的方法,将CCR5特异性锌指核酸酶表达质粒与绿色荧光蛋白和嘌呤霉素重组质粒共转染到人诱导多潜能干细胞,特异性地使人诱导多潜能干细胞的CCR5基因插入失活,再经过体外定向诱导分化,得到CCR5缺失型的造血干细胞。本发明的造血干细胞,可用于治疗艾滋病,为艾滋病的干细胞治疗提供一个新方法。
发明专利
CN201110115680.8
2011-05-06
CN102234628A
2011-11-09
C12N5/074(2010.01)I
中国科学院广州生物医药与健康研究院%呼吸疾病国家重点实验室
陈小平;姚永超;秦莉;那顺巴雅尔;赵思婷;覃丽梅;何正祥
510530 广东省广州市科学城开源大道190号
广州三环专利代理有限公司 44202
刘孟斌
广东;44
一种制备造血干细胞的方法,其特征在于,所述的制备方法包括如下步骤:(1)构建CCR5特异性锌指核酸酶表达载体;(2)构建同源重组供体质粒;(3)对人多潜能干细胞中的CCR5基因进行敲除,并采用绿色荧光蛋白和嘌呤霉素进行筛选阳性细胞的筛选,得到CCR5基因敲除的人多潜能干细胞;(4)诱导CCR5基因敲除的人诱导多潜能干细胞进行分化,得到CCR5基因敲除型造血干细胞。