RT-LAMP检测方法在快速检测丙型肝炎病毒载量中的应用

摘要：

本发明公开RT-LAMP检测方法在快速检测丙型肝炎病毒载量中的应用，包括以下步骤：（1）选取HCV的特异性基因片段用于LAMP扩增；（2）用于HCV基因扩增的结果判断；用于HCV基因扩增的体系为二步法或者一步法；步骤（2）中在检测时使用Sybgreen染液实时观察，加入梯度浓度的标准品以及阴性血清对照，在紫外灯下每5分钟对标准品、对照及待测样本直接观察，即可获得待测样本的HCV载量。本发明对于硬件设备的要求低，操作简便快捷，适用于现场或基层检测，且本发明既可以用于定性检测HCV病毒的有无，也可以用于HCV病毒载量的初步判断。

专利类型：发明专利

申请/专利号：CN201110045349.3

申请日期：2011-02-25

公开/公告号：CN102649981A

公开/公告日：2012-08-29

主分类号：C12Q1/70(2006.01)I

申请/专利权人:上海交通大学医学院

发明/设计人:李擎天;熊慧;金维荣;郭晓奎;王颖

主申请人地址:200025 上海市卢湾区重庆南路280号

专利代理机构:上海翼胜专利商标事务所(普通合伙) 31218

代理人:翟羽

国别省市代码:上海;31

权利要求：

RT?LAMP检测方法在快速检测丙型肝炎病毒载量中的应用，包括以下步骤：（1）选取HCV的特异性基因片段用于LAMP扩增；（2）用于HCV基因扩增的结果判断；其特征在于，步骤（1）中用于HCV基因扩增的特异性引物为：F3：GCAGAAAGCGTCTAGCCA；B3：CTCGCAAGCACCCTATCA；FIP：TACTCACCGGTTCCGCAGTTTTTGCAGCCTCCAGGACCCC；BIP：TGGAGATTTGGGCGTGCCTTTTTGCCTTTCGCGACCCAACA；用于HCV基因扩增的体系为二步法或者一步法；步骤（2）中在检测时使用Sybgreen染液实时观察，加入梯度浓度的标准品以及阴性血清对照，在紫外灯下每5分钟对标准品、对照及待测样本直接观察，即可获得待测样本的HCV载量。