SmDXS和SmGGPPS双基因共转化提高丹参酮含量的方法
本发明涉及生物技术领域,是一种提高丹参酮含量的方法,用丹参1-脱氧木酮糖-5-磷酸合成酶(SmDXS)和丹参牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶(SmGGPPS)基因构建成SmDXS和SmGGPPS基因的植物双价高效表达载体,遗传转化丹参叶片获得转SmDXS和SmGGPPS基因的丹参毛状根。本发明获得的转基因丹参毛状根中丹参酮含量显著提高,其中一个株系的总丹参酮含量为对照的6.29倍。本发明提供了一种提高丹参毛状根中丹参酮含量的方法,也为生产具重要临床需求的丹参酮提供了一种新型优质原料。
发明专利
CN201110034229.3
2011-01-31
CN102174563A
2011-09-07
C12N15/82(2006.01)I
上海师范大学
开国银;周聪聪;张昂;鞠冠华;陈莹;郭莺莺
200234 上海市徐汇区桂林路100号
上海伯瑞杰知识产权代理有限公司 31227
吴瑾瑜
上海;31
SmDXS和SmGGPPS双基因共转化提高丹参酮含量的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将1?脱氧木酮糖?5?磷酸合成酶基因SmDXS和牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶基因SmGGPPS插入植物表达载体,构建重组载体;所述的1?脱氧木酮糖?5?磷酸合成酶基因和牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶基因序列分别为SEQ?ID:1和SEQ?ID:2的DNA序列;(2)将步骤(1)所获得的重组载体转入发根农杆菌,构建含有重组载体的发根农杆菌;(3)用步骤(2)所得含有重组载体的发根农杆菌介导1?脱氧木酮糖?5?磷酸合成酶基因和牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶基因转化丹参,获取毛状根;(4)检测步骤(3)毛状根中的1?脱氧木酮糖?5?磷酸合成酶基因和牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶基因,取筛选结果为阳性的转基因毛状根。